动物肠黏膜上皮细胞的培养

　　1. 取妊娠17-19d胎鼠，放入70%乙醇中消毒1min。经腹正中切口取出小肠，放入预冷的PBS中。

　　3. 将肠壁剪成1mm3左右的小块的组织块，放入20ml消化液中，37℃水浴中振荡消化30min。

　　4. 用吸管反复吹打组织块3-5min，然后以1000r/min，离心5min。吸去消化液后，加入PBS，反复吹打，悬浮沉淀的肠绒毛组织。在相差显微镜下观察可见单个黏膜上皮细胞或隐窝细胞团。

　　5. 将消化下来的细胞或细胞团加入分离管中，再加入分散液，吹打均匀，静置1min。然后，收集含细胞或细胞团的上清液。重复3-4次。

　　6. 将收集的上清液离心(1500r/min，5min)。用分散液将单个细胞和肠隐窝细胞团混悬，离心(1500r/min，5min)，重复3-4次。

　　7. 用培养液混悬沉淀细胞，将细胞悬液加入培养皿或培养瓶中，放入37℃，含5%CO2的孵箱中培养。