不连续密度梯度分离法分离NK细胞

　　PNK细胞即自然杀伤细胞，是一群具有自然杀伤能力的大颗粒淋巴细胞，无粘附作用。它们不需要抗原激活，也没有MHC性，即能直接杀伤肿瘤细胞。成熟的NK细胞离开骨髓进入外周免疫器官，主要分布在脾脏和外周血中，约占外周血的3%。

　　④以3倍体积的Hank’s液稀释细胞，置于聚蔗糖-泛影葡胺分层液上，离心，2000r/min，20min;

　　③将不同梯度的Percoll轻轻地一层层铺起，从高度密度至低密度加，最后加1ml细胞悬液于顶部;

　　⑤小心地吸取第二、三部分的细胞。第一部分是顶部液体与40% Percoll之间，第二部分是40%与42.5%Percoll之间，第三部分是42.5%与45%的Percoll之间，这两部分富含NK细胞;

　　通过形态学分析，Percoll密度梯度离心分离的NK细胞80%为大颗粒淋巴细胞，细胞活力95%。