PriCells： 动物小血管内皮细胞的分离

　　1. 处死动物后，局部消毒取出主动脉，用加入抗菌素的PBS冲洗，放入盛有PBS的平皿中，摘除血管外的脂肪和结缔组织。

　　2. 用细丝线结扎血管的一端，用镊子轻轻夹住结扎侧的末端，用一铁丝将扎住的末端捅进血管内，将血管翻转过来，使内皮细胞面向外。血管另一侧的末端也塞进血管内，用细丝线结扎住，使整个血管仅内皮细胞在外面。

　　3. 把血管放至盛有5mol 0.2%胶原酶的平皿中，置于37℃ CO2孵箱中消化10-15min，多次摇动平皿，以便内皮细胞脱落。消化近结束时，在倒置显微镜下观察，若大部分内皮细胞已脱落，加少量培养液终止消化。

　　4. 将消化液收集到离心管中，1000r/min离心5min。加入培养基重悬制成细胞悬液，放入T25的细胞培养瓶中，置于37℃，含5%CO2的孵箱中培养。2天换液1次。