从外周血分离单个核细胞，以粘附法除去其中的单核细胞后，以尼龙棉柱法除去其中的B细胞，余下的T细胞和NK细胞以磁化细胞分离器(MACS)进行分离。有两种方法：阴性选择法，在反应中加入抗CD3抗体，使T细胞与之结合后形式磁性分离柱内，以除去标记的T细胞，洗下的未标记细胞;阳性选择法，在反应中加入抗CD16及抗CD56，使NK细胞与之结合形成磁性免疫复合物留于柱内，将未标记细胞洗去后，将标记的NK细胞以洗液轻轻加压洗脱。
2. 将单个核细胞的浓度用含10%血清RPMI-1640调整为4×106/ml，加入到无菌的塑料平皿中，37℃，7.5%CO2中培养2h后，除去粘附于塑料的单核细胞和B细胞;
3. 非粘附细胞与含10%血清RPMI-1640液预孵育1h后过尼龙棉柱，B细胞和剩余的单核细胞粘附在尼龙棉柱上，用培养液洗柱，收集洗下的T细胞和NK细胞;
4. 用分离T细胞和NK细胞：以无菌操作标记和分离细胞。新分离的T细胞和NK细胞在水浴中进行标记，细胞先与抗表面抗原的单抗孵育10min(107个细胞用100ul抗CD3单抗或25ul抗CD16单抗或抗CD56单抗)，细胞经洗涤后与生物素标记的100ul羊抗鼠抗血清孵育10min，洗涤后加入FITC标记的链霉亲和素25ul，反应8min，洗涤后加生物素标记的磁颗粒(加抗CD3单抗者加100ul磁颗粒，加25ul抗CD16单抗或抗CD56单抗者加50ul磁颗粒)反应8min。上述每步反应后，均以10倍体积的含1%牛血清白蛋白的PBS洗涤，3000r/min离心8min，以终止反应。使用磁化细胞分离器(MACS)作免疫磁性分离。分离柱在使用前以高压灭菌。
5. 将标记有磁性复合物的细胞悬液重悬于2～5ml含1%牛血清白蛋白的PBS中，调其细胞浓度为5×107～1×108细胞/ml。将分离柱先与含1%牛血清白蛋白的PBS预孵育30min，4℃预冷后放入永久性磁铁的中，将标记细胞悬液加80～100ml。将分离柱拿出，用50ml洗液在无菌条件下以注射器轻轻加压洗脱标记的细胞，离心沉淀细胞，用荧光显微镜分析，用台盼蓝估计存活率，以RPMI-1640液保存。
NK细胞为CD16+、CD56+、CD3-细胞。若反应中加入了抗CD3单抗，则洗脱的未标记细胞为NK细胞;约反应中加入了抗CD16、抗CD56单抗，则柱中保留的标记细胞为NK细胞。前一种方法为阴性选择法，后一种方法为阳性选择法。
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