(2) 在培养皿中加入HBSS,然后放皮条,使真皮面朝下,皮片漂浮其中。在37℃条件下,孵育8-10d,每3d换液1次。
(4) 在-80℃和37℃下反复冻融植块10次,以去除存活的细胞成分,从而形成以胶原纤维网架为主的真皮组织,作为以后角质形成细胞生长的支持物,然后将线℃水浴中融化冻存的真皮植块,放入培养皿内,使线℃条件下孵育过夜。
(2) 将角质形成细胞种植到线) 角质形成细胞贴附于真皮植块后,将复合培养的植块转移到无菌的不锈钢网上,移至新的培养皿内。
(4) 加入培养液,培养液的量不能超过不锈钢网高度,让表面的角质形成细胞于空气当中,促进细胞分化。在加液过程中要防止气泡形成,以免液气界面。
在真皮上复合培养的角质形成细胞分化能力良好,可分化形成明显的棘细胞层、颗粒细胞层和角质细胞层等表皮结构。
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