细胞的冻存和复苏

　　在不加任何条件下直接冻存细胞时，细胞内和外中的水都会形成冰晶，能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等，能引起细胞死亡。如向培养液加入剂，可使冰点降低。在缓慢的冻结条件下，能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在-130℃以下的低温中能减少冰晶的形成。

　　目前常用的剂为二甲亚砜(DMSO)和甘油，它们对细胞无毒性，量小，溶解度大，易穿透细胞。

　　注意：操作时应小心，以免液氮冻伤。液氮定期检查，随时补充，绝对不能挥发干净，一般30立升的液氮能用1～1.5月。

　　培养基加入甘油或DSMO，使其终浓度达5-20%。剂的种类和用量视不同细胞而不同。配好后4℃下保存。