sin α /2的最大值必然小于1;介质为空气，镜口率一般为0.05~0.95;油镜头用香柏油为介质，镜口率可接近1.5。
普通光线nm，分辨力数值不会小于0.2μm，人眼的分辨力为0.2mm,因此显微镜的最大设计倍数为1000X。
聚光镜中央有挡光片，照明光线不直接进人物镜，只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜，因而视野的背景是黑的，物体的边缘是亮的。
把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处。
2、相位板(annular phaseplate)：物镜中加了涂有氟化镁的相位板，可将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ。
光源前有偏振片(起偏器)，使进入显微镜的光线为偏振光，镜筒中有检偏器(与起偏器方向垂直的偏振片)。
1952年，Nomarski发明，利用两组平面偏振光的，加强影像的明暗效果，能显示结构的三维立体投影。标本可略厚一点，折射率差别更大， 故影像的立体感更强。
物镜与照明系统，前者在载物台之下，后者在载物台之上，用于观察培养的活细胞，通常具有相差物镜，有的还具有荧光装置。
以电子束作光源，电作透镜。电子束的波长短，并且波长与加速电压(通常50~120KV)的平方根成反比。
电子束穿透力很弱，用于电镜观察的标本须制成厚度仅50nm的超薄切片，用超薄切片机(ultramicrotome)制作。
通常以锇酸和戊二醛固定样品，丙酮逐级脱水，环氧树脂包埋，以热膨胀或螺旋推进的方式切片，重金属(铀、铅)盐染色。
用重金属盐(如磷钨酸)对铺展在载网上的样品染色;吸去染料，干燥后，样品凹陷处铺了一层重金属盐，而凸的出地方没有染料沉积，从而出现负染效果，分辨力可达1.5nm左右。
亦称冰冻断裂。标本置于干冰或液氮中冰冻。然后断开，升温后，冰，出了断面结构。向断裂面上喷涂一层蒸汽碳和铂。然后将组织溶掉，把碳和铂的膜剥下来，此膜即为复膜(replica)。
分辨力为6~10nm，由于人眼的分辨力(区别荧光屏上距离最近两个光点的能力)为0.2mm，扫描电镜的有效放大倍率为0.2mm/10nm=20000X。
工作原理：是用一束极细的电子束扫描样品，在样品表面激发出次级电子，次级电子的多少与样品表面结构有关，次级电子由探测器收集，信号经放大用来调制荧光屏上电子束的强度，显示出与电子束同步的扫描图像。
为了使标本表面发射出次级电子，标本在固定、脱水后，要喷涂上一层重金属膜，重金属在电子束的轰击下发出次级电子信号。
原理：根据隧道效应而设计，当原子尺度的针尖在不到一个纳米的高度上扫描样品时，此处电子云重叠，外加一电压(2mV~2V)，针尖与样品之间形成隧道电流。电流强度与针尖和样品间的距离有函数关系，将扫描过程中电流的变化转换为图像，即可显示出原子水平的凹凸形态。
在倒置显微镜下利用显微操作器进行细胞或早期胚胎操作的一种方法。显微操作器是用以控制显微注射针在显微镜视野内移动的机械装置。
细胞核移植技术已有几十年的历史，Gordon等人(1962)对非洲爪蟾进行核移植获得成功。我国著名学者童第周等上个世纪70年代在鱼类细胞核移植方面进行了许多工作，并取得了丰硕。
2、化学固定：如甲醇、乙醇、丙酮、甲醛、戊二醛和锇酸等试剂。显示多糖常用乙醇固定，显示酶类多用甲醛丙酮缓冲液固定。
1、金属沉淀法：如磷酸酶分解磷酸酯底物后，反应产物最终生成CoS或PbS有色沉淀，而显示出酶活性。
2、Schiff反应：细胞中的醛基可使Schiff试剂中的无色品红变为红色。用于显示糖和脱氧核糖核酸(Feulgen反应)。
3、联苯胺反应：过氧化酶分解H202。产生新生氧，后者再将无色联苯胺氧化成联苯胺蓝，进而变成棕色化合物。
根据免疫学原理，利用抗体同特定抗原结合，对抗原进行定位测定的技术。常用的标记物有荧光素和酶。
酶标免疫法(enzyme-labeled antibody method)：常用的酶有辣根过氧化物酶，酶与底物发生反应后形成不透明的沉积物，从而显示出抗原存在的部位。
细胞中有一些成分具有特定的吸收光谱，核酸、蛋白质、细胞色素、维生素等都有自己特征性的吸收曲线。
用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等等。
原理：将放射性同位素标记的化合物导入生物体内，经过一段时间后，制取切片，涂上卤化银乳胶，经放射性，使乳胶感光。
一般用14C和3H标记。常用3H-TDR来显示DNA，用3HUDR显示RNA;用3H氨基酸研究蛋白质，用3H甘露糖、3H岩藻糖研究多糖。
具有互补核苷酸序列的两条单链核苷酸片段，在适当条件下，通过氢键结合，形成DNA-DNA，DNA-RNA或NA-RNA杂交的双链。这种技术可用来测定单链核苷酸序列间是否具有互补关系。
是体外分析DNA序列的方法，操作时先用性内切酶将核DNA或线粒体DNA切成DNA片段，经凝胶电泳分离后，转移到醋酸纤维薄膜上，再用探针杂交，通过放射自显影，即可辨认出与探针互补的特殊核苷序列。
用介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过离心力场的作用使细胞分层、分离。
原理：样品各成分在连续梯度的介质中经过一定时间的离心则沉降到与自身密度相等的介质处，并停留在那里达到平衡，从而将不同密度的成分分离。
原理：包在鞘液中的细胞通过高频振荡控制的喷嘴，形成包含单个细胞的液滴，在激光束的照射下，这些细胞发出散射光和荧光，经探测器检测，转换为电信号，送入计算机处理，输出统计结果，并可根据这些性质分选出高纯度的细胞亚群，分离纯度可达99%。包被细胞的液流称为鞘液，所用仪器称为流式细胞计(flow cytometer)。
群体培养(mass culture)：将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶中，让细胞贴壁生长，汇合(confluence)后形成均匀的单细胞层;
克隆培养(clonal culture)：培养高度稀释的细胞悬液，细胞贴壁生长，每一个细胞形成一个细胞集落，称为克隆。
原代培养(primary culture)：即：培养直接来自动物机体的细胞群，将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶称为传代或传代培养(Passage)。
细胞系(cell line)：从肿瘤组织培养建立的细胞群或培养过程中发生突变或的细胞，可无限繁殖。
1、外植体培养：诱发产生愈伤组织。用于研究植物的生长发育、分化和变异;进行无性繁殖;制取代谢产物。
通过培养和介导，两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合(cell fusion)或细胞杂交。
细胞融合的方法：生物方法(仙台病毒、副流感病毒和新城鸡瘟病毒)、化学方法(聚乙二醇PEG)、物理方法(电击和激光)。
正常淋巴细胞(如小鼠脾细胞)具有分泌抗体的能力，但不能长期培养，瘤细胞(如骨髓瘤)可以在体外长期培养，但不分泌抗体。于是英国人Kohler和Milstein 1975将两种细胞杂交而创立了单克隆抗体技术，获1984年诺贝尔。
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