生物技术干细胞工程

  动物早期胚胎细胞、动物胚胎内细胞团细胞、动物胚胎干细胞和动物原始生殖细胞均具有全能性和多能性,并可以在体外增殖、冷冻,因而是克隆动物的理想材料。动物早期胚胎细胞数最少,在体外培养易分化。动物原始生殖细胞具有和胚胎干细胞相似的特性,在体外分化可形成多种组织,但PGC细胞数量有限,了其应用。自从在延迟着床胚胎中分离出小鼠胚胎干细胞以来,包括小鼠在内的各种动物胚胎干细胞的分离受到国内外科学家的关注。胚胎干细胞在克隆动物,生产转基因动物,创建人类遗传疾病动物模型,研究细胞分化,细胞与细胞的相互关系以及用人类胚...

G418筛选稳定表达细胞系

6.确定最佳筛选浓度:在筛选10~14天内能够所有细胞的最小G418浓度即为最佳筛选浓度。在第一轮就筛选出最佳G418浓度的可能性不大,最有可能的是出现这种情况:用某一浓度G418的量在筛选14天后还不能细胞,而用下一个梯度的 G418的量在10天前就看不到活细胞了。假如是400ug/ml不能细胞,而800ug/ml在第5天就把所有细胞都了,则可以再用500ug /ml、600ug/ml、700ug/ml进一步筛选,以确定最佳筛选浓度!:由于特性明确的细胞系G418的最佳用量还是比较稳定的,所以有时候不需...

Oncotarget:中性粒细胞与淋巴细胞比值预测神经胶质瘤患者情况!

  神经胶质瘤的临床症状可分两方面,一是颅内压增高症状,如头痛、、视力减退、复视、症状等;另一是肿瘤、浸润、脑组织所产生的局灶症状,早期可表现为刺激症状如局限性癫痫,后期表现为神经功能缺失症状如瘫痪。...

甲醇酵母表达的试验步骤

接种GS115于5ml YPD液体培养基,30℃,200rpm振荡过夜,涂布 YPD平板,30℃培养48 小时,用 YNB基本培养基和含His的补充培养基作点种分离纯化,挑选在补充培养基生上生长而在基本培养基上不生长的单菌落划YPD平板,4℃保存。...

为什么大多数细胞培养需要用二氧化碳培养箱

  对大多数以碳酸盐作为pH缓冲系统的培养液而言,为了维持稳定的pH,培养箱中的二氧化碳需要维持在2-10%之间,以保持培养液中溶解的二氧化碳的浓度。同时细胞培养的器皿需要一定程度的透气,以便于气体的交换。...

酵母表达系统

  酵母是一种单细胞低等真核生物,培养条件普通,生长繁殖速度迅速,能够耐受较高的流体静压,用于表达基因工程产品时,可以大规模生产,有效降低了生产成本。酵母表达外源基因具有一定的翻译后加工能力,收获的外源蛋白质具有一定程度上的折叠加工和糖基化修饰,性质较原核表达的蛋白质更加稳定,特别适合于表达真核生物基因和制备有功能的表达蛋白质。某些酵母表达系统具有外分泌信号序列,能够将所表达的外源蛋白质分泌到细胞外,因此很容易纯化。...

比血球计数板更方便准确的细胞计数方法推荐

上图可见:血球计数板在高细胞密度 时,计数结果与实际细胞密度有偏差,而基于图像的细胞计数仪则在多个浓度下均有较大偏差。这表明基于库尔特原理的细胞计数仪(Coulter counter和Scepter cytometer)在计数准确性上优于其他两种细胞仪。(样品为常见的COS7细胞)...

细胞内功能区隔与蛋白质分选

  从个体发生来看新细胞的内膜系统来源于原有内膜系统的,具有核外遗传(epigenetic)的特性。...

细胞生物学实验技术

  普通光线nm,分辨力数值不会小于0.2μm,人眼的分辨力为0.2mm,因此显微镜的最大设计倍数为1000X。...

细胞器的光镜切片和电镜照片观察

  甲苯胺兰染色的牛脊髓涂片,尼氏小体即光镜下的粗面内质网。在低倍镜卡观察,染成蓝色的大三角形、星形细胞就是脊髓前角神经细胞,染色较深的小细胞为神经胶质细胞。转换高倍镜观察,可见脊髓前角神经细胞的细胞质中许多蓝色颗粒或网状结构即为尼氏小体。...

细胞损伤模型

将上述肝细胞悬液分别加入24孔(每孔1 ml)和96孔(每孔0.1 ml)培养板中,置37℃,5%CO2培养箱中培养。12~16 h后可见肝细胞贴壁于培养板孔底上生长。...

细胞系或细胞株的建立

体外培养细胞的名称,随培养细胞技术的发展和细胞种类的增多而演变。最早采用的名称为细胞株(cell strain),以后又出现细胞系(cell line)一词,两者曾一度混用致概念不明确,导致文献中也很混乱。我国也曾有类似情况,在我国尚未制定出统一名词前,本书用的名词基本参考Schaeffer,W.I.(1979)和国内有关会议、以及国内外常用名词为准。...

原代细胞的概述

  原代细胞的质量取决于多个因素:组织、培养基、特别是它还与实验人员分离组织的技术息息相关。如果你对分离组织不甚精通或者很难组织来源地稳定性,市售的原代细胞是一种不错的选择。...

人角质形成细胞的分离培养

  2.将皮肤展评,用手术刀切成2-3mm2的小片,放入中性蛋白酶消化液中,4℃下消化15-20h,或37℃下消化2-4h。...

液泡系的活体染色及电镜照片观察

  中性红是液泡系特殊的活体染色剂,只将液泡系染成红色,在细胞处于生活状态时,细胞质及核不被染色,中性红染色可能与液泡中的蛋白有关。...