密度梯度离心基础

  在速率一区带离心中混合样品的以很薄的一层铺在梯度液的上部,在离心过程中由于不同组份"颗粒"在梯度液中沉降速率的差别,而在离心的某一时刻形成了数个含左第一级份颗粒的"区带"。离心过程在最垂"的样品(或者说沉降得最快的样品)形成沉殿前就停止了。样品在离心后与梯度液一起收集,用常规技术去除梯度材料后就得了某个较纯的成份。每个单一组份的沉降速率取决于它们的形状、尺寸、密度、离心力的大小、梯度液的密度和粘性系数。...

免疫磁性微珠分离法分离T淋巴细胞和B淋巴细胞

1. MACS柱的准备新MACS柱需高压灭菌,60℃烘干后备用。使用前(至少2h前)应准备完毕。将2~3个C型MACS柱内分别用10ml注射器在柱下三通阀们处加入10mlMACS柱浸湿液,使液面达到柱内铁丝基质平面上2~3Cm处,关闭柱下三道阀们备用;...

干细胞的“完全手册”

  在胚胎的发生发育中,单个受精卵可以发育为多细胞的组织或器官。在成年动物中,正常的生理代谢或病理损伤也会引起组织或器官的修复再生。胚胎的分化形成和成年组织的再生是干细胞进一步分化的结果。胚胎干细胞是全能的,具有分化为几乎全部组织和器官的能力。而成年组织或器官内的干细胞一般认为具有组织性,只能分化成特定的细胞或组织。...

炎症性内皮细胞胞外囊泡对周皮细胞状态的调控作用

  来自日本富山大学的山本诚士和同事为此进行了一系列体外研究,以确定炎症引发的E-EVs在血管内皮细胞和周皮细胞/血管平滑肌细胞间通信中起到的作用。他们发现,在炎性细胞因子和内毒素的刺激下,血管内皮细胞立即脱落型E-EVs,流式细胞仪分析结果显示,这种效应受剂量控制。...

正常大兔骨间充质前体细胞的体外成软骨培养

3. 在直径为10mm的培养皿中接种2×107个有核细胞。于37℃、5%CO2饱和湿度的CO2培养箱中培养。培养物用完全培养液维持生长14d。每隔4d换液1次;...

细胞的冻存和复苏

  目前常用的剂为二甲亚砜(DMSO)和甘油,它们对细胞无毒性,量小,溶解度大,易穿透细胞。...

动物子宫颈部上皮细胞的培养

7. 氢化可的松:将1mg氢化可的松溶解于1ml 50%乙醇(v/v,用蒸馏水配制)。然后,按100ul分装,在-20℃储存。最终浓度为0.5ug/ml...

培养细胞的细胞生物学

  虽然体外细胞与机体细胞存有差异,但并未失去研究的意义。且不论其有许多性状仍与体内相同(如体外培养的心肌细胞仍可博动),只从细胞遗传学(Cyto-genetics)的角度看,离体细胞仍带有全套的二倍体基因。细胞在培养中的表现,只不过是相应基因关闭/引起的现象,这并非是绝对缺陷。恰恰相反,在培养的细胞中某些特定功能的,可为该基因的表达与调控提供线、分化;体外培养的细胞分化能力并未完全,只是的,细胞分化的表现和在体内不同。细胞是否表现分化关键在于是否存在使细胞分化的条件,如Friend细胞(小鼠红白血病细胞...

细胞的基本结构

  内膜系统将细胞质分隔成不同的区域,即所谓的区隔化(compartmentalization)。区隔化使细胞内表面积增加了数十倍,代谢能力增强。...

研究T细胞产生的细胞因子的方法

  检测细胞因子mRNA的试验主要有:竞争性聚合酶链反应、Northern印迹杂交、斑点杂交、逆聚合酶链反应、原位杂交。...

人真皮复合培养法

(4) 在-80℃和37℃下反复冻融植块10次,以去除存活的细胞成分,从而形成以胶原纤维网架为主的真皮组织,作为以后角质形成细胞生长的支持物,然后将线℃水浴中融化冻存的真皮植块,放入培养皿内,使线℃条件下孵育过夜。...

干细胞群缺乏“交流”疑为脱发罪魁

  这个团队与来自英国大学的数学生物学家合作,对剃毛老鼠和兔子在数月里毛发生长模式的变化进行了分析。毛发生长模式的变化说明了毛囊中干细胞在活跃和休眠状态之间的周期性发展。相关论文发表于4月29日的《科学》(Science)。...

正常大鼠前脂肪细胞的培养

② 将含有细胞和组织块的消化液倒入加有培养液a的烧杯中,用吸管反复吹打。然后通过孔径为25μm的尼龙网筛。分别收集滤液和未滤过的组织块;...

293细胞的大规模培养

293细胞是用5型腺病毒75株系,含有Ad5 E1区的人胚肾细胞。它是McMaster University的F.L.Graham与J.S.Miley于1976年用DNA转染技术构建而成。293细胞是贴壁依赖型成上皮样细胞,表现出典型的腺病毒细胞的表型,细胞允许Ad5和其他血清型腺病毒在其上增殖。293细胞为人亚三倍体细胞系。293细胞在无Ca2+或含Ca2+培养基中可同样生长,也可生长在血清浓度降低的培养基中。...

磷酸钙细胞转染技术

  1传代细胞准备细胞在转染前24h传代,待细胞密度达50%~60%满底时即可进行转染。加入沉淀前3~4h,用9ml完全培养液培养细胞。...