免疫学技术--生物岛网

基础免疫实验:免疫沉淀反应几种实验方法

  可溶性抗原与相应的抗体混合,在电解质存在的条件下,两者比例适合,即可有沉淀物出现,叫沉淀反应(Precipitation).由于沉淀反应抗原多系胶体溶液.沉淀物主要是由抗体蛋白所组成....

免疫组化:PTX3在人类急性心肌梗死组织中的表达

  2)结合键的:抗体对远离蛋白质联接点的半抗原部分有最好的性,故联接时应使联接键远离半抗原的决定簇....

抗体抗原实验:半抗原——载体连接方法

  2)结合键的:抗体对远离蛋白质联接点的半抗原部分有最好的性,故联接时应使联接键远离半抗原的决定簇....

免疫组化:B淋巴细胞膜表面免疫的检查

SmIg 是B 细胞的抗原识别受体,也是B 细胞的表面标志,用直接免疫荧光法可检查出SmIg。用荧光素标记的抗Ig抗体,在一定条件下与淋巴细胞混合,荧光素标记的抗Ig 抗体可以与B 细胞表面的Ig 结合,在荧光显微镜下观察可见B细胞膜上出现荧光。此方法可用来鉴定B 淋巴细胞。...

免疫组化:石蜡切片免疫组化染色步骤

  现用现配.将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中,停留20~30秒钟,取出稍停片刻,再入纯丙酮溶液或蒸馏水中涮去未结合的APES,置通风橱中晾干即可.用此载玻片捞片时应注意组织要一步到位,并尽量减少气泡的存在,以免影响染色结果....

免疫组化:免疫组织化学技术(用于石蜡切片)

  免疫组化是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(酶、荧光素、金属离子、同位素)显色来确定组织、细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry,IHC)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry,ICC)....

免疫细胞检测技术:流式细胞仪、免疫磁珠及亲和板结合分离法分选c kit+肝癌的比较

肿瘤干细胞研究需要获取高纯度、高活力、高增殖能力的肿瘤亚群细胞,并尽量避免混杂细胞、低活力、低增殖能力细胞对细胞亚群特性的干扰.笔者在前期研究的基础上,比较了流式细胞仪分选(flow cytometry sorting,FCMS)、免疫磁珠分选(magnetic cell sorting,MACS)及亲和板结合分离法(immune panning isolation)3种方法分选c kit+肝癌细胞的效果,以期找到一种分离肝癌亚群细胞的较佳方法,为肿瘤干细胞的研究奠定基础....

免疫细胞检测技术:石蜡包埋组织的流式检测问题

常规固定(多数用福尔马林)、石蜡包埋的组织块均可用于流式细胞术,但含苦味酸或汞的固定液均不宜使用.切片厚度以30~50微米为宜.切片脱蜡要干净、彻底,否则制备出的细胞悬液中碎片多,影响测定.梯度酒精水化后用胃蛋白酶或胰蛋白酶消化,消化后镜检呈单个分散状态;由于福尔马林固定可使DNA 和核蛋白产生共价交联,影响DNA和染料的化学定量结合,导致荧光强度下降,蛋白酶可其联结,改善测定的组方图质量,消化时间以能分散细胞及细胞碎片尽量少为适度,以100目尼龙筛网滤去未消化完的组织片,离心去上清液后,加入冰冷的70%...

免疫组化:Wnt10b基因对脂肪细胞和肌细胞的调控作用

  Wnt10b:Wnt10b是Wnt因子家族之一,是一种胞外信号,它通过一系列复杂信号通调控胚胎发育、干细胞定向分化等生理过程.有研究表明Wnt10b基因的活性能能够组织培养的脂肪细胞的发育....

ELISA:ELISA实验数据处理

  单击曲线,按右键,选择“添加趋势线”,在类型中,选择多项式;在选项中,选择显示公式,选择显示R平方值....

免疫检测分析:生物素—亲合素系统

  生物素-亲合素系统(Biotin-Avidin—System,BAS)是70年代末发展起来的一种新型生物反应放大系统.随着各种生物素衍生物的问世,BAS很快被广泛应用于医学各领域.1979年Guesdon利用生物素和亲合素间具有高度亲合力的特点,建立了标记亲合素和生物素法(LAB/BA)与桥联亲合素—生物素技术(BRAB).1981年Hsu首次报告了改进的亲合素—生物素—过氧化酶复合物法(ABC法).近年大量研究,生物素—亲合素系统几乎可与目...

免疫细胞检测技术:流式细胞仪检测凋亡:Annexin VPI双染色法

细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,目前早期识别仍有困难.这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS在细胞膜外表面.PS是一种带负电荷的磷脂,正常主要存在于细胞膜的内面,在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被而使PS在细胞膜外.Annexin V是一种Ca+依赖的磷脂结合蛋白,最初发现是一种具有很强的抗凝血特性的血管蛋白,Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性.对PS有高度的亲和性.因此,该蛋白可充当一的探针检测在细胞膜表面的PS.PS转移到细胞膜...

基础免疫实验:间接凝集反应

1. 间接血球凝集试验是根据红血球表面的吸附作用而建立起来的。将细菌可溶性抗原提出使之吸附血球表面,此时红血球即称为“致敏红血球”。这种致敏的红血球具有细菌的抗原性,与相应的抗血清相遇可产生凝集现象。...

免疫荧光:免疫胶体金的特性和制备

  胶体金(colloidalgold)也称金溶胶(goldsol),是由金盐被还原成原金后形成的金颗粒悬液.胶体金颗粒由一个基础金核(原子金Au)及包围在外的双离子层构成,紧连在金核表面的是内层负离子(AuC12-),外层离子层H+则分散在胶体间溶液中,以维持胶体金游离于溶胶间的悬液状态.胶体金颗粒的基础金核并非是理想的圆球核,较小的胶体金颗粒基本是圆球形的,较大的胶体金颗粒(一般指大于30nm以上的)多呈椭圆形.在电子显微镜下可观察胶体金的颗粒形态....

免疫检测分析:放射免疫分析法原理及操作注意事项

  放射免疫分析的原理:就是利用放射性核素标记抗原或抗体,然后与被测的抗体或抗原结合,形成抗原抗体复合物的原理来进行分析的.它又分为两种方法....