1976年由bradford建立的考马斯亮兰法(bradford法),是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的.这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点,因而正在得到广泛的应用.这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法....

2. 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的过程中,要注意电压过高引起发热而导致蛋白质变性,所以最好在电泳槽外面放置冰块以降低温度;...

用户可以把序列整理为FASTA格式,或提供SWISS-PROT标识,或者是可唯一确定的添加号.若用户提供了序列,该工具会自动计算全序列的 pI和量;若用户提供的是SWISS-PROT标识,程序会显示该条目的描述和记录;如果用户给出了一段序列片段范围则计算将在该片段上进行,而不是针对整个序列....

　　由于同工酶在不同组织、器官中的分布不同,即具有组织器官性.因此已利用同工酶的酶谱作临床诊断的依据,也被利用于生物分类及遗传育种等工作中....

“点击化学”(Click Chemistry)的核心是开辟一整套以含杂原子链接单元C-X-C为基础的组合化学新方法，用少量简单可靠和高选择性的化学转变来获得更广泛的多样性，其模块化、高效和多样性以及高选择性等特点，使之特别适合偶联生物与人工配体，因为这类偶联反应一般需要在非常温和的条件(如生理学条件)下进行，如此一来便可保留多肽、蛋白质以及碳水化合物等生物的结构完整性以及基于这些结构的功能。而且点击反应后生成的氮杂唑基团具有芳香环的稳定性，不易分解，可耐受强酸、强碱，并能在多种氧化还原条件下保持稳定。因此...

　　预电泳是除去凝胶中没有聚合的单体和双体和聚合引发剂,提高分辨率,不加任何物质,一般30-60分钟后加样电泳....

　　由于蛋白质是生物大,而紫外吸收往往是其内的小基团所引起的,例如酪氨酸、苯丙氨酸,色氨酸和肽键等等.因此当蛋白质不同,其包含的上述小基团含量发生变化时,就会影响蛋白质含量的测定.然而蛋白质种类繁多,结构复杂,很难对其进行有效的归类.例如人体内含蛋白质的种类约有10万种,整个生物界的蛋白质种类估计有100亿种....

用十二烷基硫酸钠(SDS)和还原剂(琉基乙醇或二硫苏糖醇)热处理蛋白质样品,蛋白质中的二硫键被还原,解离的亚基与SDS 发生1 : 1.4 的定量结合.SDS 使蛋白质亚基带上大量负电荷,了蛋白质各种亚基间原有的电荷差异.亚基的构象均呈长椭圆棒状,各种蛋白质亚基-SDS 复合物表现出相等的电荷密度.在电场中其迁移速率仅与亚基质量有关,因此,SDS-聚丙烯酞胺凝胶电泳可以进行蛋白质亚基分离,并用来测量蛋白质亚基的质量....

　　就像α螺旋和β折叠片的可以预测出来一样,其它特定的结构或结构特征,如卷曲螺旋和跨膜区也可以预测出来.但这类预测的方法没有二级结构预测方法多,主要是由于这些结构或结构特征的折叠规律尚不十分清楚.尽管如此,若待预测序列在已知结构数据库中能搜索到相似蛋白,则可以提高预测的准确性....

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3.2 硫尿：与尿素一起,能增加疏水膜蛋白的溶解性,缺点是在平衡液里与蛋白的半胱氨酸竞争结合碘代乙酰胺,会使蛋白的烷基化不完全,硫尿还有SDS与蛋白质结合的作用,也可能增加脂类的溶解性,影响二向的效果.一般是2mol/L的硫尿与5-7mol/L尿素结合使用....

　　蛋白质是典型的两性电解质.它在大于其等电点的pH中解离成带负电荷的阴离子,向电场的正极泳动,在小于其等电点的pH中解离成带正由荷的阳离子,向电场的负极泳动.这种泳动只有在等于其等电点的pH中,即蛋白质所带的净电荷为零时才能停止.如果在一个有pH梯度的中,对各种不同等电点的蛋白质混合样品进行电泳,则在电场作用下,不管这些蛋白质的原始分布如何,各种蛋白质将按照它们各自的等电点大小在pH梯度中相对应的处进行聚焦,经过一定时间的电泳以后,不同等电点的蛋白质便分别聚焦于不同的.这种按等电点的大小,生物在pH梯度...

　　理论分析方法或从头算方法(Abinitio)：通过理论计算(如力学、动力学计算)进行结构预测,该类方法假设折叠后的蛋白质取能量最低的构象.从原则上来说,我们可以根据物理、化学原理,通过计算来进行结构预测.但是在实际中,这种方法往往不适合.主要有几个原因,一是自然的蛋白质结构和未折叠的蛋白质结构,两者之间的能量差非常小(1kcal/mol数量级),二是蛋白质可能的构象空间庞大,针对蛋白质折叠的计算量非常大.另外,计算模型中力场参数的不准确性也是一个问题....

一般样本：1) 通常由色析法所收集到的各分划样本,都可以直接进行蛋白质定量分析;但若其中含有某些干扰因子(如含有Triton),或样本的浓度太浓,都必须将样本稀释后再测.2)同一样本的若干不同稀释浓度,所测出来的最终蛋白质浓度会有差异,通常是以稀释度大者较为准确....

　　1、HPLC分离、纯化蛋白质的速度快。通常半小时左右可进行一次，大大缩短了纯化蛋白质的时间;...