凝胶干燥时遇到的主要问题是凝胶的变形和破裂.将凝胶放在Whatman 3MM滤纸上可防止干燥凝胶变形,但凝胶是否破裂取决于凝胶的厚度和干燥器的质量,因此,应尽量使用薄胶并使凝胶干燥器处于良好状态,使其真空压力波动极少.
(2)电泳后的凝胶用5~10倍体积固定液在室温下固定,酸性固定液扩散后可使凝胶中的溴酚蓝变黄.蓝色全部消失后,继续固定5min.为防止凝胶破裂,在进行步骤(2)之前可将凝胶浸泡于含20%甲醇、30%甘油的溶液中过夜.
(3)将凝胶标记好方向后放在保鲜膜或玻璃纸,放一张比凝胶四周长出1~2cm的Whatman 3MM滤纸.
(4)另将一张滤纸放在凝胶干燥器上.将Whatman 3MM滤纸/凝胶/保鲜膜或玻璃纸,放在凝胶干燥器上的滤纸,保鲜膜或玻璃纸在最.
(5)放下凝胶干燥器的盖子,抽真空使凝胶四周封闭以干燥凝胶,干燥时间常由厂家提供,一般0.75mm厚凝胶干燥2h,如50~65℃可加快干燥进程.真空.如加热状态下干燥,则先停止加热并自然冷却10min后再真空.
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