蛋白分离纯化:重组蛋白纯化的基本策略

  分辨率:由选择的方法和层析介质生成窄峰的能力来实现.总的来说,当杂质和目标蛋白性质相似时,在纯化的最后阶段分辨率是重要因素.

  1、通过组和各种方法使纯化步骤之间的样品处理减至最少,以避免需要调节样品.第一个步骤的产物的洗脱条件应适宜于下一个步骤的起始条件.

  3、GF很适宜在由浓缩效应的方法(IEX、HIC、AC)后使用,凝胶过滤对上样体积有,但不受缓冲液条件的影响.

  5、如果对目标蛋白的性质了解甚少的情况下,可采用IEX-HIC-GF的方法组合作为标准方案.

  注:应该指出,三阶段纯化策略不是说所有的策略都必须是三个纯化步骤.所用的步骤数目取决于纯度要求和蛋白的最终用途.

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