在重组蛋白纯化的过程中,研究者常常利用融合表达的各种亲和标签,通过一步法亲和纯化的方法获得自己的目的蛋白.其中,6×His•Tag标签因其氨基酸个数少、对蛋白活性影响较小、亲和纯化方便,成为大家常用的选择.但是,His Tag并非万能标签,依然有不少使用因素,如:对重金属离子、不适合金属离子螯和层析方法的蛋白;活性不稳定的蛋白;对蛋白纯度要求更高等.所以,研究人员仍然需要不断寻找更适合自己的亲和标签.
Novagen最新推出的Strep•Tag II 8氨基酸小标签,就是一个新选择.我们早已熟知biotin和streptavidin之间能够高度的结合,这种性结合早已广泛用于免疫或者非放标记反应中.Novagen模拟Biotin设计了一个8个氨基酸的小标签Strep•Tag II,正好能的结合到streptavidin上,又再优化streptavidin与小标签的结合位点,使之与Strep•Tag II融合标签的结合力超出普通streptavidin约100倍,称为Strep•Tactin蛋白.当表达产物经过Strep•Tactin亲和纯化柱时,融合表达Strep•Tag II的融合蛋白高地结合在亲和柱上,经过反复洗涤杂蛋白后,可以用一种生物素的类似物――2.5 mM脱硫生物素,在温和的PBS或者其他生理条件缓冲系统就能彻底洗脱目的蛋白,温和条件有助于保持蛋白的活性.
系列携带Strep•Tag II 融合标签的原核、昆虫、哺乳动物细胞表达质粒,满足各种蛋白表达需要
推荐试剂盒: 分别含pET-51b、pET-52b载体;配套纯化预装柱、缓冲液及检测用抗体.
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