基础知识:交叉电泳实验技术

  交叉免疫电泳是把琼脂平板电泳和火箭电泳结合起来的一种方法.先将抗原样品在琼脂凝胶中进行电泳分离,然后使已分开的各抗原成分与原泳动方向呈90 度角的方向泳向含抗体 的琼脂凝胶中,于是该抗原样品中的各个抗原成分和它相对应的抗体依次形成若干锥形沉淀线,根据沉淀线的及面积(或高度)可确定该抗原的质和量.此试验可以用来鉴定抗原,即与标准抗原抗体系统相比较,就可知待测样品中抗原的质和量.此法也可以鉴定抗体,把未知的含抗体的样品与标准抗原反应,所得的结果与标准的抗原、抗体反应结果比较,从而可以确定其中所含抗体成分及其滴度.

  5.取上述1%溶化的琼脂糖10ml放入60℃水浴中,加入预热的适当浓度的血清抗体迅速混匀,铺入切去的琼脂部分.冷却后,用不含抗体琼脂密封切口.

  6.将玻板与原电泳方向成90度角放置,使泳动后的抗原凝胶置于负极,电泳.电压为3V/cm,泳动10h~20h.

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