蛋白分离纯化:DNA沉淀法提取C1q

  1. 将血清装入透析袋中,用pH值8.6、0.05mol/L巴比妥DETA缓冲液在4℃透析过夜,测定袋内外导电率和pH值是否相等,如相等,则表示透析完成,1000r/min,离心30min,除去非性沉淀物;

  6. 上清液过Sephadex G200柱(柱长100cm),用pH值5.3、0.3mol/L PB洗脱,以除去DNase和DNA消化产物,将C1q峰收集后,加2.8%硫酸铵使之沉淀(4℃),5h后离心沉淀,沉淀物溶于pH值7.0、0.1mol/L PB中,并用此缓冲液透析过夜,再离心除去不溶物,上清液即为纯化90%以上的C1q,可用于双扩散试验,用于放射免疫试验则需进一步纯化;

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