蛋白分离纯化:蛋白质纯化之亲和层析法

  1.亲和层析胶体1 mL 已经装填在管柱内,成为一淡蓝色胶柱.请把管柱架直在铁架上,去除下方的填塞物,用buffer B-300/0 流洗20 mL 后塞住出口,准备注入样本.

  2.除去胶面上方的缓冲液,并取出样本 (IEX) 使其回到室温,慢慢用滴管加到亲和胶体上,小心勿弄乱胶体表面;让样本没入胶体中,同时收集流出液每管2.5 mL.

  5.所有分划均定量蛋白质并测定酶活性,收集酶活性最高的数个分划,共得 _______ mL (AF),保留100 μL 以供分析.

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