SDS-PAGE:过氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳

  由(2)式可以看出,凡能影响溶液粘度η的因素如温度,影响带电量q及解离度a的因素如pH的改变,都会对迁移率产生影响.因此,电泳应尽可能在恒温条件下进行.并选用一定pH的缓冲液.同时,所选用的pH以能扩大各种被分离物质所带电荷量的差异为好,以利于分离各种成分.迁移率与粒子的大小(r)有关,非球形粒子(如DNA)在电泳过程中会受到更大的阻力,即粒子的移动速度还与粒子形状有关...

蛋白质修饰:蛋白质二级结构预测-人工神经网络方法

  用于蛋白质二级结构预测的基本神经网络模型为三层的前馈网络,包括输入层、隐含层以及输出层。每一层由若干神经元组成,输入层神经元与隐含层的神经元是完全连接的,即任何一个输入层神经元都与任何一个隐含层的神经元连接。同样,隐含层神经元与输出层的神经元也是完全连接的。如下图:...

Native-PAGE:Native-PAGE原理

地址:陕西省西安市灞桥区新寺569号唐都医院临床教学楼312室 邮箱:联系电话 传线号 技术支持:陕西奈特星网络发展有限公司...

蛋白质含量测定:植物体内可溶性蛋白质含量的测定(福林-酚法的原理)

试管若干;刻度移液管0.5ml 1支,1ml 1支,10ml 1支;定量加样器;圆底烧瓶;冷凝管1套(带橡胶管);微量滴定管;小烧杯;微量进样器50μl 1支;721分光光度计;恒温水浴器;研钵;玻棒;离心机;离心机....

SDS-PAGE:SDS-PAGE电泳过程中常见问题以及解决方法

A:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基硫酸钠),SDS会与变性的多肽,并使蛋白带负电荷,由于多肽结合 SDS的量几乎总是与多肽的量成正比而与其序列无关,因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关,在达到饱和的状态下,每克多肽可与1.4g去污剂结合.当量在15KD到200KD之间时,蛋白质的迁移率和量的对数呈线性关系,符合下式:logMW=K-bX,式中:MW为量,X为迁移率,k、b均为,若将已知量的标准蛋白质的迁移率对量对数作图,可获得一条标准...

2D电泳技术:抑郁大鼠海马的双向凝胶电泳图谱分析

以雄性成年SD大鼠10只,采用慢性不可预见的轻度应激(chronicunp redictable mild stress,CUMS)制作抑郁症模型.将动物予以夹尾1 min、禁水24 h、禁食24 h、45℃5 min、昼夜24 h、水平振荡30 min (160次/min)、4℃冰水游泳5 min,7种刺激每天随机采取1种,共安排3周.经行为学测试:蔗糖水试验和旷野试验(open - field test)评估模型后,三氯乙酸/丙酮沉淀法提取海马组织蛋白质,以固相pH梯度双向凝胶电泳分离蛋白质,考马斯亮...

蛋白质修饰:蛋白质二级结构预测软件

  目前较为常用的几种方法有:PHD、PSIPRED、Jpred、PREDATOR、PSA,其中最常用的是PHD.PHD结合了许多神经网络的,每个结果都是根据局部序列上下文关系和整体蛋白质性质(蛋白质长度、氨基酸频率等)来预测残基的二级结构.那么,最终的预测是这些神经网络每个输出的算术平均值.这种结合方案被称为陪审团决定法(jurydecision)或者称为所有胜利者(winner-take-all)法.PHD被认为是二级结构预测的标准.总的来说,二级结构预测仍是未能完全解决的问题,一般对于α...

Native-PAGE:Native-PAGE的分类

Blue Native PAGE是最古老的Native-PAGE技术.是以考马斯亮蓝作为电泳分离后蛋白质鉴定染料的一种电泳方法.这种方法的缺点是:考马斯亮蓝与蛋白的结合起到了去垢剂的作用,可能导致复合物的分离;并对化学发光或蛋白质辅基的荧光或荧光染料的标记具有潜在的猝灭作用....

蛋白质含量测定:种子蛋白质含量测定(凯氏定氮法)

根据蛋白质的含氮量比较恒定,平均约为16% ,通过测定样品的含氮量进而推算蛋白质的含量.种子中的氮化物可分为蛋白氮和非蛋白氮.用三氯乙酸溶出种子粉或脱脂种子粉中的非蛋白氮化物(氨基酸、酞胺 和无机氮),沉淀样品中的蛋白质并使二者分离.在催化剂参与下,用浓硫酸消煮分解样品,使蛋白氮为氨态氮,并与硫酸结合生成硫酸按.加碱蒸馏,使氨释 放出来并吸收于一定量的硼酸中,再用标准酸滴定,求出样品中氮含量,乘以16%的倒数6.25 即可换算成蛋白质含量....

蛋白质含量测定:血浆游离血红蛋白测定

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蛋白质修饰:蛋白质二级结构预测-Chou-Fasman预测方法

通过对大量已知结构的蛋白质进行统计,为每个氨基酸残基确定其二级结构倾向性因子。在Chou-Fasman方法中,这几个因子是Pα、Pβ和 Pt,它们分别表示相应的残基形成α螺旋、β折叠和转角的倾向性。另外,每个氨基酸残基同时也有四个转角参数,f(i)、f(i+1)、f(i+2)和 f(i+3)。这四个参数分别对应于每种残基出现在转角第一、第二、第三和第四位的频率,例如,脯氨酸约有30%出现在转角的第二位,然而出现在第三位的几率不足4%。根据Pα和P&b...

蛋白质含量测定:HPLC法测定注射用肌苷的含量

  肌苷对照品(含量99.2%,中国药品生物制品检定所),注射用肌苷分别为山西(规格:0.3g批号20060101;2006126);海南(规格:0.2g批号20051201).甲醇为色谱纯,试验用水为重蒸馏水....