质粒提取：层析法纯化质粒DNA
当然,试剂盒的发展也有积极的一面.商家的试剂盒也的确在不断地改进和优化质粒克隆的方法.在过去,小量制备质粒通常采用溴化乙锭 - 氯化铯密度梯度离心的方法.当进行 DNA 操作的酶远没有现在的可靠时,要想得到所需末端的 DNA 片段并与载体连接确实相当困难;获得相当多的阳性重组子不是一件容易的事.并且时由载体本身形成的菌落数与由连接反应获得的菌落数往往几乎一样多.另外含有重组质粒的阳性子通常需通过杂交或繁琐的多次小量制备分析来进行鉴定.过去每分析 100 个菌落以上仅获得一个阳性克隆的情况屡见不鲜.冷泉港实...
抗体抗原实验：抗血清的制备
作免疫用的动物有哺乳类和禽类，主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等，实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量，如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因动物反应良好，而且能够提供足够数量的血清，用于免疫的动物应适龄，健壮，无感染性疾患，最好为///雄性，此外还需十分注意动物的饲养，以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。若用兔，最好用纯种兔，一组三只，兔的体重以2～3kg为宜。...
基础免疫实验：凝集吸收实验
1、1/10稀释伤寒杆菌免疫血清分别与肠炎杆菌与伤寒杆菌进行玻片凝集,可见伤寒免疫血清与两种菌均有凝集,说明二菌具有共同抗原结构,故发生交叉凝集反应....
实验动物基本操作：实验动物体液采集方法
代谢笼用于收集实验动物自然排出的尿液,是一种特别设计的为采集实验动物各种排泄物的密封式饲养笼,有的代谢笼除可收集尿液外,又可收集粪便和动物呼出的CO2.一般简单的代谢笼主要用来收集尿液.防在代谢笼内饲养的实验动物,可通过其特殊装置收集尿液....
实验动物模型：局灶性脑缺血的标准动物模型
Watson首次建立了光化学脑皮质梗塞动物模型.立体定向仪固定大鼠头部,颅骨,尾静脉注射光敏材料荧光素、荧光素钠、四碘荧光素二钠或四碘四氯荧光素二钠(rose bengal),然后用特定冷光源(卤素灯或氨灯)照射局部头颅,光线透过头皮切口处的颅骨与血管内的染料接触,激发光化学反应,产生单线态氧,引起皮层内血管内皮细胞损伤,血小板聚集,导致照射区内血栓形成,皮层缺血坏死....
蛋白提取：蛋白质裂解液的选择
所以,蛋白质裂解液的选择除了要根据其“产量”,还要看所选择的一抗的是否能识别经变性的蛋白质样品.一般对于不能识别变性的蛋白质样品的一抗,其蛋白质裂解液都会是不含去污剂或含有较温和的非离子去污剂(如：NP-40,Triton X-100)....
基础知识：染色方法（蛋白质染色、脂蛋白、核酸）
染色液种类繁多,各种染色液染色原理不同,灵敏度各异.使用时可根据需要加以选择.常用的染色液有：...
DNA提取与纯化：小麦黄化苗总DNA的提取
疼痛神经元扩大了接触性皮炎和牛皮癣等症状的炎症。尽管它在过敏性和自身免疫性炎症中具有重要性，但是迄今为止尚不知道疼痛神经元是否调节病原体的炎症。免疫学前沿研究中心(IFReC)的科学家发现，Nav1.8离子通道表达的疼痛神经元真菌炎症和骨。...
Cell Rep：研究真菌感染和骨损伤的新机制！
疼痛神经元扩大了接触性皮炎和牛皮癣等症状的炎症。尽管它在过敏性和自身免疫性炎症中具有重要性，但是迄今为止尚不知道疼痛神经元是否调节病原体的炎症。免疫学前沿研究中心(IFReC)的科学家发现，Nav1.8离子通道表达的疼痛神经元真菌炎症和骨。...
抗体抗原实验：人VL基因文库的构建
8、用含甘油文库储存材料细菌接种到含100ug/ml氨苄青霉素和1%葡萄糖的100ml 2X TY培养基中,制备每种VL基因文库DNA.接种量应足够大以接种细菌数至少比文库容量大5倍.过夜培养后,按标准的DNA质粒制备方法进行操作.为了续后进行文库消化,可合并不同文库的DNA....
实验动物基础：近交系动物概述
以上定义对于小鼠常严格的, 但是对于其它的动物有时需要加以区别.在某些情况下“近交系”的名称仅仅说明了该品系内的遗传差异性降低了.这种情况出现在：品系的近交代数在各繁殖线代.但是该系的某一条繁殖线上所有个体间的异体植皮获得成功.两代之间间隔时间特别长的动物也许只要通过几代的兄妹交配繁殖就能使用“近交系”这个名称....
实验动物基本参数：老年病研究中实验动物的选择
目前,用于老年医学研究的实验动物以哺乳类动物为主体,有小鼠、大鼠、豚鼠、兔、狗、猪、猴等,其中大鼠使用最多,并广泛用于各种项目的研究,其中以细胞生化学、消化器、激素、酶等的研究为主.小鼠的使用率虽比大鼠低,但用途广泛,以放射线、消化器、免疫、酶的研究为主.鱼类、两栖类、爬虫类以及无脊椎动物等,绝大多数被用以比较生物学的研究.对各研究项目每年所使用的实验动类进行调查,结果发现在DNA、染色体、放射性、细胞生物学、培养细胞、脑神经、循环器、呼吸器、肾脏、消化器、内分秘、运动器、皮肤、感觉器、结缔组织、RNA等...
蛋白提取：苦瓜籽蛋白的提取和分离
1.3仪器：TU-1810型紫外可见分光光度计（普析通用仪器有限责任公司） ,透析袋,层析柱,离心机（8000r/min）,烘箱...
蛋白分离纯化：超滤原理和优缺点
1、滤过程是在常温下进行,条件温和无成分,因而特别适宜对热的物质,如药物、酶、果汁等的分离、分级、浓缩与富集....
DNA提取与纯化：脉冲场凝胶电泳(PFGE)实验
为避免大 DNA 在提取过程中断裂,细胞需在琼脂糖凝胶块中进行原位裂解,在本实验中,我们使用金葡萄球菌 (StapHylococcus aureus) 作为例子....