DNA提取与纯化：质粒DNA的提取和纯化中问题的分析讨论
在提取质粒DNA时,对于小的质粒可用煮沸、碱处理、SDS等剧烈的方法,但较大的质粒易受损,应采用温和裂解法,将细菌悬于蔗糖等渗溶液中,用溶菌酶和EDTA(乙二胺四乙酸)处理,细胞壁和细胞外膜,再加SDS(十二烷基磺酸钠)一类去污剂溶解球形体.要获得大量的质粒DNA关键是裂解寄主细胞.如果寄主细胞没有完全裂解,就会显著降低质粒DNA的回收率.理想状况是是每一个细胞都充分破裂到能使质粒DNA顺利溢出,又没有污染过多的DNA.我们实验时尽量使操作谨慎仔细,使细胞裂解反应温和,以得到清亮的裂解液.但尽管如此,...
免疫组化：p53蛋白在肿瘤细胞中的表达
p53是一种肿瘤基因,由这种基因编码的蛋白质是一种因子,其控制着细胞周期的启动,许多有关细胞健康的信号向p53蛋白发送.P53基因具有阻滞细胞周期、促进细胞调亡、维持基因组稳定和肿瘤血管生成等调控作用.P53基因突变后,由于其空间构象发生改变,将失去了对细胞生长、凋亡和DNA修复的调控作用.在人类50%以上的肿瘤组织中均发现了P53基因的突变,这是肿瘤中最常见的遗传学改变,说明该基因的改变很可能是人类肿瘤产生的主要发病因素....
ELISA：ELISA方法的基本类型、用途及操作程序Ⅱ
酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA):是酶免疫测定技术中应用最广的技术.其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 )表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除.常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大抗原,后者用于测定抗体....
实验动物基本操作：麻醉家兔、大鼠中脉压的测定
3. 用于家兔或者大鼠的医用塑料导管（家兔用导管外径为2mm，内径为1.5mm；大鼠用导管外径为1mm，内径为0.8mm，比较柔软的塑料导管）...
实验动物基础：仓鼠(地鼠)在生物学研究中的应用
5.地鼠对皮肤移植的反应特别,封闭群内个体间皮肤移植常可存活,并能长期下来,但不同群体间移植则100%被....
蛋白提取：植物蛋白质提取方法总汇
2、加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下过夜,然后离心(4℃8000rpm以上1小时)弃上清....
蛋白分离纯化：高效反相液相色谱
由于在反相色谱中，使用了乙腈、甲醇等价格高且有一定毒性的试剂，在一定程度上使该方法的使用受到。例如可使部分蛋白失活。因此，该方法用在分析鉴定方面更多一些，特别是对有机溶剂具有耐受性的样品。例如多肽样品，可用HPRPC对合成的肽huBPP进行分析。...
DNA提取与纯化：小鼠肝组织DNA的提取
用简单的盐溶液鸡尾酒法洗涤大肠杆菌能够使其处于感受状态,在这种状态下, DNA 可以进入细胞.现在大部分应用于细菌的化学方法都基于 Mandel 和 Higa 的实验结果,他们发现细菌用冰冷的 CaCl2 处理后,在 37 ℃和 42 ℃加热能够被λ噬菌体 DNA 转染.同样的方法随后也被应用于以质粒 DNA 和大肠杆菌染色体 DNA 细菌....
质粒提取：感受态大肠杆菌的制备和
用简单的盐溶液鸡尾酒法洗涤大肠杆菌能够使其处于感受状态,在这种状态下, DNA 可以进入细胞.现在大部分应用于细菌的化学方法都基于 Mandel 和 Higa 的实验结果,他们发现细菌用冰冷的 CaCl2 处理后,在 37 ℃和 42 ℃加热能够被λ噬菌体 DNA 转染.同样的方法随后也被应用于以质粒 DNA 和大肠杆菌染色体 DNA 细菌....
Cancer Cell：重大进展！新型血液活检技术可通过读取血小板信息来快速检测肺癌
最近，来自荷兰的研究人员通过研究设计了一种进行液体活检的不同方法，相比寻找血液中癌细胞DNA或其它的而言，这种名为thromboSeq的新型检测手段能够通过检测被血液中循环血...
免疫荧光：免疫荧光染色技术
固定后以冷的0.01Mol/L pH7.4PBS液浸泡冲洗,最后以蒸馏水冲洗,防止自发性荧光....
饲养：兔舍的要求
长毛兔 因汗腺极不发达,体表又有浓密的被毛,所以对温度非常.据试验,仔兔的最适温度为30～35℃,幼兔为20～25℃,成年兔为15～20℃.建舍时要考虑温度.长毛兔对低温有较强的耐受力,健康兔在-20～-39℃ 条件下仍能,不会冻死.不过为维持体温,需消耗较多营养,如不能满足所需营养,则对产毛和增重都有明显影响.据试验,长毛兔采毛前后对温度的要求差别较大.采毛前因被毛长密,体热散失少;采毛后因体表毛短,体热放散可增加30%以上.所以,寒冷季节采毛后必须做好保温工作,以防感冒,但在采毛4周后,可保持温度在5...
实验动物基本操作：实验动物编号的常规方法
该方法对于实验周期短的实验动物较合适,时间长了染料易退掉;对于哺乳期的子畜也不适合,因母畜容易咬死子畜或把染料舔掉....
基础知识：蛋白质药品冷冻干燥技术研究进展
冷冻干燥技术最早于1813年由英国人Wollaston发明.1909年Shsckell试验用该方法对抗毒素、菌种、狂犬病毒及其它生物制品进行冻干保存,取得了较好效果.在第二次世界大战中,对血液制品的大量需求大大刺激了冷冻干燥技术的发展,从此该技术进入了工业应用阶段.此后,制冷和真空设备的飞速发展为快速发展冷冻干燥技术提供了强有力的物质条件.进入上个世纪的***十年代,科学技术的迅猛发展和人民群众对健康保障的需求为药品冷冻干燥技术的飞速发展提供了强大的动力,在药品冻干损伤和机理、药品冻干工艺、药品冷冻干...
Western-blot：western显影常见现象、原因及解决方案
其中两张片子的压法如下描述: 先剪一张比膜长2"3厘米的片子(以供贴胶带),然后剪2片细小透明胶带贴到片子的左右两边(贴时胶带留一半用于粘到封口膜上),然后将片子压到膜上,并使透明胶带留出的一半粘到封口膜上.这样就固定了第一张,就不会因为放、取第二张而使第一张移动了.然后放第二张,与第一张片子贴在一起就行,注意片子要干燥,压片前用纸擦干封口膜,以避免被底物液体污染导致与下面一张粘在一起.取时用手轻轻拂过就可以把片子与下面一张错开了,不要用手抠,否则下面一张也移动了. 在洗下面一张片子时一定要取掉...