基础知识：HPLC基础知识
色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationaryphase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出.又称为色层法、层析法....
基础知识：一些提高蛋白质的稳定性的方法
脑啡肽(Enk)N端5肽线形结构是与δ型受体结合的基本功能区域,干扰素(IFN)是一种广谱抗病毒抗肿瘤的细胞因子.黎孟枫等人化学合成了 EnkN端5肽编码区,通过一连接3肽编码区与人α1型IFN基因连接,在大肠杆菌中表达了这一融合蛋白.以体外人结肠腺癌细胞和多形胶质瘤细胞为模型,采用3H-胸腺嘧啶核苷掺入法证明该融合蛋白肿瘤细胞生长的活性显著高于单纯的IFN,通过Naloxone竞争阻断实验证明,活性的增高确由 Enk导向区介导....
Current Biology：解析生长素调控叶片展开的机制
中国科学院遗传与发育生物学研究所焦雨铃研究组的最新研究发现，植物激素生长素对于叶片原基的展开至关重要。在前期的研究中，焦雨铃研究组发现叶片原基中存在生长素浓度差异，近轴面（叶片靠近茎尖一侧，即背面）生长素浓度低，远轴面（腹面）生长素浓度高（2014， PNAS 111：18769-18774）。通过对生长素、生长素信号转导通下游的响应因子进行精细成像，该研究组进一步发现生长素与下游响应因子MP仅存在部分重叠，从而在近-远轴面之间的中间区界定了高生长素信号。进而，MP可以直接激活WOX1和PRS在中间区的表...
质粒提取：选择合适的大肠杆菌菌株
解决毒性蛋白问题的办法包括使用可扩增的低拷贝数载体,或者使用含有能外源DNA序列的原核终止信号的高拷贝数载体.另一种可能的方法是使用可降解colE1型质粒拷贝数的大肠杆菌菌株.有几个商品化的大肠杆菌菌株(如Stratagene公司ABLE C和ABLE K)可是colE1质粒的拷贝数降低4-10倍,因此由质粒编码的毒性蛋白的水平也得到同样程度的降低.尽管质粒DNA在这些菌株中的产量降低,但仍足以满足克隆中的大多数要求....
免疫细胞检测技术：流式细胞术测效靶杀伤实验
做免疫学特别是肿瘤学实验,总免不了要测淋巴细胞或其他细胞对肿瘤细胞的杀伤,老外最常用的是Cr51放射实验,但这个方法在国内的不少地方都不能做,而MTT这个方法又太老了,而且也不准确,那么替代方法就用流式细胞术,又方便,又准确,这也是偶参照老外的方法吧....
免疫荧光：部分荧光染色实验经验共享
A.取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间,无菌超净台内吹干或用细胞培养级PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍,再用细胞培养液洗涤一遍.将盖玻片置于六孔板内,种入细胞培养过夜,使约为50%-80%满....
实验动物基础：实验动物常见的人兽共患病
病理变化：大鼠无可见的病理改变.人工感染乳小鼠和地鼠,可见广泛性充血、出血、变性、坏死.其中以肺、肾为最重....
实验动物基本操作：性别鉴定的方法
着床前动物胚的性别鉴定方法有数种,包括：染色体图谱分析、存在于雄性动物胚表面H-Y抗体的测定、X染色体酵素量的测定及利用Y染色体探针进行杂交反应等.这些方法在实际应用时,却面临了试验步骤繁琐、准确性及度不足、需要特殊技术及仪器设备等因素而不易实际应用.近年来,因为生物技术的快速进展,加上聚合酶连锁反应技术的发明,使原本极为微量的DNA样品,能够在数小时的反应时间内大量的克隆,因此只要应用显微操作技术,抽取少许的胚叶细胞进行聚合酶连锁反应,即可快速准确地分析出胚的性别,达到控制家畜后代性别的目的....
蛋白表达：凋亡蛋白Survivin在骨肉瘤中的表达及其与PTEN、cyclinD1的关系
Survivin是近年来发现的一种细胞凋亡蛋白家族,除具有较强的细胞凋亡作用外,还有调节细胞周期和肿瘤血管等多种生物学特性.它选择性表达于多种常见的恶性肿瘤,而在癌旁正常组织和分化组织中不表达.PTEN是人类发现的第1个具有酪氨酸磷酸酶作用的抑癌基因,在调控细胞生长以及凋亡过程中也发挥着重要的作用.本文利用免疫组化技术检测Survivin、PTEN和cyclinD1蛋白在骨肉瘤中的表达,初步探讨Survivin在骨肉瘤发病机理中的作用以及其与PTEN、cyclinD1相互间的关系....
蛋白分离纯化：离子交换层析纯化超氧化物歧化酶
(2)将糊状物移入3号砂芯漏斗中,用蒸馏水淋洗.如此重复,每加一次去离子水,浸泡一段时间,再进行抽滤,至洗涤液pH等于4即可(pH试纸试)....
质粒提取：质粒载体的克隆
这些听起来很容易,然而要确保克隆实验的顺利成功,必须深思熟虑!在拿起移液器之前,必须做出如下考虑：...
免疫荧光：免疫胶体金技术的基本原理及制备方法、应用
1971年Faulk 和Taytor将胶体金引人免疫化学,此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法,在生物医学各领域得到了日益广泛的应用.目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法( immunochromatogra-phy)和快速免疫金渗滤法(Dot-immuogold filtration assay DIGFA),用于检测 HBsAg、HCG 和抗双链DNA抗体等,具有简单、快速、准确和无污染等优点....
实验动物基本参数：豚鼠的技术资料
豚鼠食量大而旺盛,对变质的饲料特别,会减食或废食,甚至引起流产.对抗菌素,投药后容易引起死亡和肠炎,使用青霉素可引起小肠和结肠炎.它夜间少食少动,体内(肝脏和肠内)不能合成维生素C,所需维生素C全部来源于饲料.豚鼠体内缺乏合成维生素C的酶,因此饲养豚鼠时,需在饲料或饲水中加维生素C或新鲜蔬菜,当维生素C缺乏时出现坏血症,症状是后肢出现半瘫痪....
实验动物基本操作：哺乳动物离体心脏灌流实验
了解哺乳类动物心脏离体灌流方法（Langendorff 氏法）和离体心脏冠脉血流量的测定灌流.观察肾上腺素、乙酰胆碱对心脏活动及冠脉流量的影响....
基础知识：细菌蛋白质抽取的方法步骤
(5) 取出含菌块的离心管置碎冰上,待菌块溶解后,以液体均匀悬浊的.再加入10 mL lysis buffer 轻轻悬浮的....