蛋白提取:科学家发现可以用屎壳郎来提取抗菌蛋白

  一般的细菌用抗菌素就能将其杀灭,但也有些细菌却无论什么抗菌素都不怕.更让医生们束手无策的是,这种所谓的“耐性细菌”的种类还在不断增加....

蛋白质浓缩方法总结

透析袋是最常用的方法,透析袋有各種大小不同的網目,可以分開量不同的大小。常見的透明年糕紙,也有近似透析袋的作用;而香腸的腸衣也正是一種透析膜,可以透出水分及小。透析除盐原理:利用半透膜原理,透析袋为半透膜,水和盐离子等小可以通过,而大的蛋白质不能通过.器材:1.pH7.4,0.01M PB缓冲液,30%PEG2.纳氏试剂操作:1.透析大量除盐:将装有粗提物的透析袋悬于烧杯内,用透析1~2小时,再用PB置4℃透析换液多次,用纳氏试剂检查至透析液内无氨离子2.透析后,袋内水增多,用30%PEG浓缩,...

“基因剪刀”CRISPR Cas9 技术使新细胞模型更有效地测试基因治疗的疗效

  慢性肉芽肿病是免疫系统的遗传性疾病。由于基因缺陷,受影响患者的细胞不能摄入的细菌和真菌,引起危及生命的感染和具有严重不良后果的过度炎症反应。该疾病可以通过从健康供体的骨髓移植形成血液的干细胞来治愈。当没有匹配的干细胞供体可用时,可以在全世界的几个进行基因治疗。临床上在患者中使用基因治疗之前,必须在实验室中对人细胞确定治疗的功效,细胞模型对于这一步骤是最重要的。...

质粒提取:质粒的不相容性

  携带相同复制子的质粒是从细胞中的质粒库中随机挑选出来进行复制的.但是,这并不能确保两个不同的质粒在一个菌落中的拷贝数总能保持相同.例如,较大的质粒比较小的质粒需要更多的复制时间,因而在同一个菌落的每个细胞中其选择地位处于劣势.即使质粒大小相似,可可能不相容,这是因为在各个细菌细胞中来自随机过程的复制起始效率是不平衡的.这种不平衡可以很快导致两种质粒在拷贝数上严重失衡.在一些细胞中,一种质粒处于绝对优势;而在另一些细胞中,与之不相容的另一种质粒却占尽上风.在无选择条件下,细菌生长几代之后,占少数的质粒可...

抗体抗原实验:单克隆抗体生产技术

  单克隆抗体的生产既可采用动物体作为生物反应器进行生产,又可采用人工生物反应器培养杂交瘤细胞进行生产,前者可通过诱发实体瘤及腹水瘤,从腹水中提取,也可采用牛淋巴液体外循环,从培养上清中提取McAb,后者在体外大量培养杂交瘤细胞,常采用旋转培养法,中空纤维培养法,悬浮搅拌培养法等....

ELISA:快速ELISA检测动物组织或材料中的盐酸克伦特罗残留

  克伦特罗(Clenbuterol)属于beta兴奋剂,是一种高选择性的兴奋剂和激素,具有水解脂肪、合成代谢和对非条纹肌肉组织的松弛作用.进年来被一些人非法添加到饲料中以提高脂肪型动物的瘦肉率和加速动物的生长.当用作生长调节剂时,其添加量是治疗量的5—10倍,常在动物体内残留而给消费者带来危害....

实验动物基础:模式生物---小鼠

形成了许多亚系,如BALB/cAnN, BALB/cJ,BALB/cCd.BALB/c小鼠基因型为Aa***c.毛色为白色.其乳腺癌发病率低,但对致癌因子.乳腺肿瘤发生率约为10﹪~20﹪.有一定数量的卵巢、肾上腺和肺部肿瘤、白血病的发生.肺癌发病率雌性26﹪,雄性29﹪.白血病发病率雌性12﹪,雄性10﹪.血压与其他近交系小鼠相比为最高,有自发高血压症.老年小鼠心脏有某些病变,雌雄小鼠常有动脉硬化.几乎全部20月龄的雄性小鼠均有淀粉样变.对鼠伤寒沙门氏菌C`5,对麻疹病毒中度,易患慢性肺炎,对放射线极度...

实验技能SOP:小鼠腹腔注射LD50的测定标准操作规程(SOP)

  【原理】药物给药剂量与动物死亡率间呈正态分布,以对数剂量为横坐标、死亡率为纵坐标作图,可得到一对称S型曲线,其两端较平坦,中间较陡,说明两端处剂量稍有变化时死亡率的改变不易表现出来,在50%死亡率处斜率最大,该处剂量稍有变动时,其死亡率变动最明显,即最灵敏,在技术上也最容易测得准确,所以人们常选用LD50值作为反映药物的指标.若将死亡率换算成机率单位,则对数剂量与机率单位呈直线关系,用数学方法可拟合其回归方程式,可精确地计算LD50及引起任何死亡率的剂量及相关数据....

基础知识:蛋白质工程

  目前,蛋白质工程尚未有统一的定义.一般认为蛋白质工程就是通过基因重组技术改变或设计合成具有特定生物功能的蛋白质.实际上蛋白质工程包括蛋白质的分离纯化,蛋白质结构和功能的分析、设计和预测,通过基因重组或其它手段或创造蛋白质.从广义上来说,蛋白质工程是通过物理、化学、生物和基因重组等技术蛋白质或设计合成具有特定功能的新蛋白质....

基础知识:交叉电泳实验技术

  5.取上述1%溶化的琼脂糖10ml放入60℃水浴中,加入预热的适当浓度的血清抗体迅速混匀,铺入切去的琼脂部分.冷却后,用不含抗体琼脂密封切口....

是时候来一波RNA-Seq差异表达分析实操了

  当然你完全不必真的去睡午觉,我们可以程序运行的时候准备一下tximport所需要的输入文件。...

免疫细胞检测技术:用于免疫印迹的细胞裂解液的制备

  大多数蛋白质溶液可与样品缓冲液混合并直接用于免疫印迹.下述方法可用于细胞去污剂裂解液,柱层析洗脱液和大多数其他来源的抗原样品....

实验动物基本参数:免疫学研究中实验动物的选择

小鼠的免疫球蛋白有IgM、IgA、IgE、IgG1、IgG2a和IgG2b. 小鼠很少见到典型的迟发型反应,也不象其它动物那样有规律.能诱发速发型反应,其性过敏反应的特点是循环不畅,循环性虚脱,常在几小时甚至10到 20 分钟死亡.BALB/c小鼠常用于制备单克隆抗体....

实验动物基础:实验动物遗传质量检测

  近交系小鼠遗传检测的意义就在于按照小鼠标准化命名委员会的标准审核近交系,把一切改变的等位基因予以剔除....

Leukemia:重磅!科学家有望开发出有效治疗白血病的新型组合性疗法

  2017年9月14日 讯 /生物谷BIOON/ --新型免疫疗法常常被认为能够有效治疗复发性的急性髓性白血病,通常抗体能够有效消灭被常规疗法无法杀灭的癌细胞,近日,来自癌症协会等机...