免疫细胞检测技术:血液中微粒的流式检测及临床意义

  各种血液细胞及血管内皮细胞受到刺激而活化或发生凋亡后,细胞膜磷脂酰丝氨酸由胞膜内层进入外层,以出芽方式形成小泡状结构而脱落,形成所谓的“微粒(microparticle,MP)”.正体血液中即存在少量MP,而在许多疾病中MP水平明显升高.MP具有促进血液凝固反应发生与血栓形成等多种重要生物学活性.越来越多的研究提示,检测血液MP水平与性质有助于监测病情、指导治疗与疗效判断....

实验动物基础:大鼠生物学特性和解剖生理特点

  3.喜啃咬、夜间活动、肉食,白天喜欢挤在一起休息,晚上活动大,吃食多,因此白天除实验必须抓取外,一般不要抓弄它.食性广泛,喜吃各种煮熟的动物肉.对光照较....

实验动物基础:常见兔病及防治

  兔巴氏杆菌病:又称出血性败血症,是常见的、危害很大的呼吸道传染病.一年四季均有发生,但以气候多变的春、秋两季多发.预防办法是注意卫生,加强消毒措施,定期进行疫苗注射,治疗用抗生素或口服磺胺药....

细胞培养:T 淋巴细胞实验

T 细胞在体外培养时,受到非性有丝原(如PHA、ConA)刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞.淋巴细胞率的高低可以反映机体的细胞免疫水平,因此可作为测定机体免疫功能的指标之一....

细胞培养:细胞活化与复苏

  必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害....

基础知识:丽春红(Ponceau S)染色液的配制及使用

  丽春红对蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸馏水,PBS或其它适当溶液洗去.因此,蛋白质N端测序时将SDS-PAGE胶上的蛋白转移到PVDF膜,用丽春红染色后将目的条带切下用于测序....

蛋白表达 :植物基因在大肠杆菌中的原核表达

  以pET-32a(+)为例,介绍将目的基因克隆进载体并进行表达获得重组蛋白的过程,从而熟悉根据自己的要求采用不同的载体进行原核表达的全过程....

DNA提取与纯化:从96孔微培养板生长的哺乳动物细胞中分离DNA

5、将叶子移出温箱,取出培养板平放在工作台上,冷却数分钟,每孔加入100ul NaCl/乙醇溶液.不用混匀,直接将培养板于室温温育30min.温育末期硬件到纤维状的核酸沉淀....

Nat Genetics:突破!科学家首次鉴别出诱发失眠症的7个风险基因

失眠症或许是日常生活中我们所面对最多的健康抱怨了,甚至在治疗后,睡眠不足也一直困扰着人们的健康,本文研究中研究者发现了和失眠症相关的风险基因,这对于诱发失眠症的原因非常重要。研究者Van Someren认为,这项研究是从神经元之间“交流沟通”的水平上对失眠症进行理解,我们希望后期能够开发出治疗失眠症的新型疗法。...

免疫检测分析:抗体储存的温度和时间

  抗体具有严密的三维结构,已进化成为在大多数生物中,甚至机体大面积创伤时也能保持其活性.抗体紧凑的三维结构使抗体能抵御轻度变性的,从而也使抗体的长期存放较为容易.通常需要将甘油或其他稳定剂加到储存的缓冲剂中,以保持实验室中纯化的蛋白活性....

免疫检测分析:ELISA法测定单克隆抗体的效价

ELISA 是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种性很高的试验技术.免疫酶技术是将酶标记在抗体/抗原上,形成酶标抗体/酶标抗原,称为酶结合物.该酶结合物的酶在免疫反应后,作用于底物使之呈色,根据颜色的有无和深浅,定位或定量抗原/抗体.ELISA 法是免疫酶技术的一种,其特点是利用聚苯乙烯微量反应板(或球)吸附抗原/抗体,使之固相化,免疫反应和酶促反应都在其中进行.在每次反应后都要反复洗涤,这既了反应的定量关系,也避免了末反应的游离抗体/抗原的分离步骤.在ELIS...

实验动物基本操作:大鼠实验中几种常用的采血方法探讨

在医学研究中常用大鼠制作疾病模型,是研究疾病发生机制和确定治疗方案、验证新型化合物与药标作用的有效性的较好工具[1-2].但因采血方法 不同有时可影响实验结果.大鼠的采血方法很多,虽有资料介绍,但不够详细.作者根据有关文献和多年工作经验,将大鼠采血方法作一介绍,以供参考....

实验技能SOP:实验动物处死(鼠,兔类)标准操作规程(SOP)

  此法适用于鼠类等较小的实验动物.操作时,实验人员用左手按住实验动物的背部,拇指夹住实验动物右腋窝,食指和中指夹住左前肢,右手用剪刀在鼠颈部垂直将鼠头剪断,使实验动物因脑脊髓断离且大量出血死亡....

细胞免疫治疗领域热潮兴起,企业争抢先机

  今年1月,复星医药公告,投资不超过8000万美元与Kite成立合资公司,双方各占50%股权,开拓癌症T细胞免疫疗法市场。合资公司将获得KITE的KTE-C19在中国市场的商业化以及后续产品授权许可的优先选择权。...

手把手带你迈过“细胞周期”流式检测的门槛

间期分为三个连续的阶段:第一阶段称为G1期,细胞对进行“监测",当接收到必要的信号后,细胞便开始合成 RNA和蛋白质来细胞生长;一旦条件合适细胞便进入S期,开始合成 DNA和复制其染色体 DNA,使体细胞成为4倍体,与此同时还合成组蛋白,进行中心粒复制,S期一般需几个小时;最后在G2期细胞持续生长并准备进行有丝,中心粒已复制完毕,形成两个中心体,还合成RNA和微管蛋白等,G2期比较恒定,需用1~1.5小时。...