ELISA:影响ELISA结果的常见因素及控制方法Ⅰ

在临床实验室,对试剂的准备一般不太注意,通常的做法是在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用,而忽略了这种做法有可能影响后面时间不够的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性.因此,在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20~30 min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求....

实验动物基本操作:兔采血法

  将兔置于兔固定筒内,在兔耳的中央有一条较粗、颜色较鲜红的中央动脉,用左手固定兔耳,右手取注射器,在中央动脉的末端,沿着动脉平行地向心方向刺入动脉,即可见动脉血进入针筒,取血完毕后注意止血.此法一次抽血可达15ml.但抽血时应注意,由于兔耳中央动脉容易发生痉挛性收缩,因此抽血前,必须先让兔耳充分充血,当动脉扩张,未发生痉挛性收缩之前立即进行抽血,如果等待时间过长,动脉经常会发生较长时间的痉挛性收缩.取血用的针头一般用6号针头,不要太细.针刺部位从中央动脉末端开始.不要在近耳根部取血,因耳根部软组织厚,血...

实验技能SOP:实验动物寄生虫监测标准操作规程(SOP)

  (1)观察法:用观察或借助于放大镜对动物进行仔细观察,体外寄生虫感染严重时,可引起动物脱毛、毛糙甚至由于瘙痒引起溃疡、结痂,检查时尤其注意动物易感染部位,如耳根、颈后、眼周、背部、臀部及腹股沟等.用梳子梳理动物毛发,可发现虱、蚤等节肢类寄生虫....

细胞培养:肿瘤细胞培养方法简介

  2、取编号为A、B、C三个培养瓶.首先把悬液接种入A培养瓶中,置温箱中静止培养5~20分钟后,轻轻倾斜培养瓶,让液体集中瓶角后慢慢吸出全部培养液,再接种入B培养瓶中后,向A瓶中补充少许完全培养液置温箱中继续培养....

细胞培养:细胞原代培养

  仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术器械、血球计数板、离心机、水浴箱(37℃)...

基础知识:蛋白质分析的相关技术介绍

  生物体组织细胞→破碎→离心→盐析、等电点沉淀→凝胶过滤、离子交换层析、亲和层析和高效液相层析....

蛋白提取:蛋白质提取与纯化技术

  以蛋白质和结构与功能为基础,从水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质.蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面.一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相中,如盐析,有机溶剂提取,层析和结晶等;二是将混合物置于单一物相中,通过物理力场的作用使各组分分配于来同区域而达到分离目的,如电泳,超速离心,超滤等.在所有这些方法的应用中必须注意保存生物大的完整性,防止酸、硷...

基因测序携大数据打通上下游

  近年来,全球基因组学应用行业不断实现技术突破,行业发展势头良好,科研、医疗卫生机构和普通对基因测序的接受程度越来越高。据BCCResearch预计,基因测序行业将保持快速增长势头,2020年市场规模将达138亿美元,年复合增长率为18.7%。...

质粒提取:寻找适合特殊用途的质粒载体

不幸的是,描述具有特殊性能、适于特殊目的质粒载体的文献并入容易获得.显然,使用带有逻辑运算符AND、OR和NOT并能进行布尔(Boolean)检索的数据库,如Medline、Entrez和PubMed,将大有裨益.例如,用(p15Aor IncFⅡ)[TW]ANDT7[TW]AND low-copy-number作为检索词,搜索以Medline为基础的数据库,可以获得标题含“low-copy-number”,正文含有“T7”,以及“p15A”或“IncFⅡ”的一串参考文献.此外,描述的或新质粒载体的文章通...

免疫荧光:免疫胶体金标记技术简介

  胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术.由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题,且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记,使定位更加精确.因此已成为继荧光素、酶、同位素及乳胶标记技术之后的一种新型标记技术.现已广泛应用于电镜、流式细胞仪、免疫印迹、蛋白染色、体外诊断试剂的制造等领域....

免疫组化:免疫组化技术之酶法

免疫酶法是借助酶细胞化学等手段显示组织抗原(或抗体)的新技术,是在免疫荧光法的基础上发展起来的.免疫酶法的基本原理与免疫荧光法有所相似,免疫酶法是将酶以共价键的形式结合在抗体上,制成酶标抗体,再借助酶对底物的催化作用,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,于光镜或电镜下进行细胞表面或细胞内部各种抗原成分的定位.已如前述,免疫荧光法具有操作简便、灵敏、性高、省时的优势,但同时也具有令人遗憾的不足,特别是荧光标 本不能长期保存以及需要价格昂贵的荧光显微镜才能观察的问题.为此,Nakane等人(1966...

实验动物基础:实验动物设施的等级及其规划结构要点

  通常为单走廊专用房舍,采用自然通风或设有排风装置,有防虫、防鼠设施,要求笼具和垫料消毒、使用无污染的饲料,人员进出有一定的防疫措施.这类设施仅适用于普通级动物.该系统通常分为三个区域:前区,包括检疫室、办公室、休息室等;控制区,包括动物饲育室、或动物实验室、清洁走廊、清洁物品储存室等;后勤处理室,包括污染走廊、消毒室、污物处理设施等.人员、动物和物品原则上按:前区——控制区——后勤处理区的运行....

实验动物基础:大鼠在生物学研究中的应用

  对饲养中湿度极为,相对湿度低于40%时,易患环尾病,还会引起哺乳母鼠食仔现象发生,一般饲养室湿度应保持在50~65%之间....

细胞培养:神经组织细胞培养

  2、为排除脂肪成分和其它碎块,把悬液注入离心管中,在室温直立5~10分钟后,细胞或细胞团块自然下沉,脂肪等杂物易漂浮于悬液表层,吸除上清,如此反复二三次可获得较多的细胞成分,...

藏在干细胞中的“不老泉”

“对Nanog的研究帮助我们去更好地理解衰老过程,以及最终如何逆转该过程。” 领导该研究项目的布法罗大学化学与生物工程学院的教授Stelios T. Andreadis说。...