基础知识：蛋白质一级结构（primary structure)
每一种蛋白质都有自己特有的氨基酸的组成和排列顺序即一级结构,由这种氨基酸排列顺序决定它的特定的空间结构,也就是蛋白质的一级结构决定了蛋白质的二级等高级结构,这就是荣获诺贝尔的著名的Anfinsen原理....
蛋白分离纯化：酵母蛋白质的抽提
1.从OD600=2的细胞培养物中抽提酵母蛋白质.培养物的一种简单制备方法是将细胞接种到5mlYPD中,过夜培养后获得指数培养物(OD600=0.5～2.0)....
利用表达PD-L1的造血干细胞有望治疗1型糖尿病
这项研究灌注到这些小鼠中的这些事先经过处理的造血干细胞到达胰腺(产生胰岛细胞的地方)中。几乎所有的这些小鼠在短期内都被治愈了，而且这些小鼠中的三分之一在它们的生命当中维持正常的血糖水平。不论是通过基因疗法还是利用小进行预处理让造血干细胞产生PD-L1，这种治疗方法都是有效的。...
动物所细胞核内Net1调控TGF-β信号转导机制
TGF-β/Nodal靶基因可以反馈调控信号通。例如TGF-β信号通激活2小时，可以显着增加SnoN的；另一方面，SnoN可以Smad2及Smad3的磷酸化及Smad复合体与DNA结合，是TGF-β信号通的因子。因此，作为TGF-β/Nodal信号通的靶基因，Net1可能参与了TGF-β信号通的调控。王强研究组的研究发现，在胚胎及哺乳动物细胞中敲低net1后，了TGF-β/Nodal信号活性，致使中内胚层及其衍生器官的形成产生严重缺陷。进一步...
免疫检测分析：生物素-亲和素系统(BAS)—ELISA技术
20世纪70年代后期在免疫酶技术中利用生物素-亲和素系统(biotin-avidinsystem,BAS)标记抗体发展了又一种新型生物反应放大技术,即BAS-ELISA技术,它使用生物素-亲和素-过氧化物酶复合物作为剂,组成一新的生物放大系统进一步提高检测的度.生物素(biotin)是广泛分布于动植物体内的一种生长因子,又称辅酶R或维生素H.亲和素(avidin)是卵白及某些微生物中的一种蛋白质,由4个亚单位组成.二者有高度亲和力,且均能偶联抗体、抗原和辣根过氧化物酶而不影响其生物学活性....
免疫荧光：免疫荧光组织（细胞）化学技术
① 异硫氰酸荧光素(fluorecein isothiocyante,FITC),为、橙或褐结晶粉末,有两种异构体,易溶于水和酒精等溶剂.量为389,最大吸收光谱为490～495,最大发射光谱为520～530urn,呈现明亮的黄绿色荧光,是最常用的标记抗体的荧光素....
肿瘤组织识别与分析
多标实验操作复杂，非性染色概率较高，且当出现两种标记均为膜表达或胞质表达时，染色的叠加也会影响后续分析结果。...
实验动物基本操作：实验动物的除毛
剪毛法是将动物固定后,先用蘸有水的纱布把被毛浸湿,再用剪毛剪刀紧贴皮肤剪去被毛.不可用手提起被毛,以免剪破皮肤.剪下的毛应集中放在一容器内,防止到处飞扬.给狗、羊等动物采血或新生乳牛放血制备血清常用此法....
细胞培养：细胞培养减少污染的小细节
有人穿半截袖白大褂去做实验,白大褂袖口要长,最好是袖口扎紧的那种,如果不能的话,把袖口窝向手臂.裸露的手腕部分一定也要喷酒精.戴上手套后手请避免接触工作台外面,如果不得已接触,那再喷酒精.宁可手套酒精味多一些....
科学家破解癌细胞容易突变的生物学难题
针对这一现象，许多科学家都在试图研发新药，为人类带来更多的抗癌武器，以图一举将癌细胞彻底歼灭。然而，美国西北大学（Northwestern University）的Vadim Backman教授却心生出一个与众不同的想法。在他看来，为了应对癌细胞突变而开发不同的药物是舍本逐末。既然癌症难治的根源是细胞突变，我们为什么不直接细胞突变呢？今日，《自然》子刊《Nature Biomedical Engineering》刊登了他的最新发现。...
蛋白表达：原核表达--宿主菌株选择指南
作为原核表达的宿主,对外源基因的表达会产生一定的影响,是勿庸置疑的.每一个宿主细胞都像一个微观的小工厂,按照细胞固有的程序完成“你给它们安排的生产任务”――因为很难亲眼观察微观世界中表达是如何进行的,当出现问题时,我们需要经验判断问题所在.宿主细胞对原核表达可能会产生哪些影响呢？...
蛋白表达：结核分支杆菌katG蛋白的高表达与纯化
异烟肼(INH)是一种最经济有效的抗痨药,几乎所有的抗痨方案中均包括IN H.结核分支杆菌编码的katG基因的突变可致结核分支杆菌对INH 产生耐药性[1].自1992年以来,对于katG基因变异或缺失造成分支杆菌对异烟肼 耐药的基因水平研究已较为深入[1,2],有必要在蛋白水平对耐药机制进行进一步 研究.本研究将含有katG基因的pET24b-katG表达载体埃希大肠杆菌BL21(DE3)菌株 ,获得稳定的高表达菌株后进一步对表达产物进行了纯化,并对纯化产物进行了酶活性的初 步检测....
靶向miR-204有望改善糖尿病药物的疗效
在过去的15年里，美国阿拉巴马大学分校内分泌学家Anath Shalev博士出一种至关重要的β细胞通在糖尿病中发生功能故障。...
快捷无创！最新细胞探测术轻松疾病根源
不过，一项既定分析发现，在一个亚组患者中观察到了临床相关的AAER降低，该亚组患者中与IL-13活性升高相关的生物标志物表现出升高。阿斯利康表示，未来在对第2个关键性III期临床研究STRATOS-2进行数据分析时，将重点关注这一亚组患者。目前，STRATOS-2研究正在进行中，预计将在2017年下半年获得数据。...
基础免疫实验：疫苗的分类
细菌或病毒灭活疫苗是细菌、病毒或立克次氏体的培养物,经化学或物理方法灭活制成,便之完全对原来靶器官的致病力,而仍保存相应抗原的免疫原性,如甲肝疫苗等.类毒素是由细菌在液体培养条件下,产生外毒素,经脱毒提纯工艺制成....