免疫检测分析:免疫共沉淀(Co-IP)详细步骤教程

免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上,使之与含有抗原的溶液及抗体反应后,beads上的prorein A就能吸附抗原达到...

饲养:小鼠的生理及饲养简介

小鼠寿命约1~3 年,其体温较一般乳类為低(35℃~38℃),仔鼠出生10~14 天左右开眼,而在16~21天左右离乳,由於啮齿类多有啃咬东西(coprophagia)的习惯,因此在饲养管理上必须针对此点来进行防范及规划....

实验动物基础:大鼠突变基因的特点

  血压变化可见于前述.这里主要介绍高血压大鼠的几个系统的病变,在因饲喂过量的盐而发生高血压后的大鼠.观察到类纤维蛋白变性和有些肾小动脉中间层增厚.Okamoto等研究了心血管系统,报告结节性动脉外膜炎是最常见的血管疾病,它使高血压发生率增加,高血压也变得更严重和持续时间加长,另外还可见到心脏肥大,心肌瘢痕形成和肥大以及小动脉和纤维素变性或坏死.此外红细胞增多也是自发性高血压大鼠的常见特征....

细胞培养:神经干细胞的培养

  将BrdU溶于无血清培养基,过滤除菌后加入神经球形成后再次机械分离克隆制作的单细胞悬液中(BrdU终浓度为5μmol/L),培养7d待新的神经球形成后,将神经球转移到预先涂布有多聚赖氨酸的培养板中,贴壁2h行BrdU免疫细胞化学染色。...

科学家发现功能活性更强的间充质干细胞

  中国医学科学院协和医学院教授韩忠朝研究团队首次将胎盘间充质干细胞中功能活性最强的细胞亚群鉴别出来,并申请了专利,这就是CD106阳性的胎盘间充质干细胞。...

PCR技术:PCR技术应用进展

  原位PCR就是在组织细胞里进行PCR反应,它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度的PCR技术的优点,是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较大潜力的新技术....

PCR基础篇(实验总结)

B. 预定PCR仪的使用时间,按照扩增的引物,模板,酶等的要求以及PCR仪的说明正确设定PCR程序,并检查验证。注意,不要把分和秒的单位搞错了。...

蛋白表达:IPTG蛋白表达的原理及方法步骤

  确定无误后进行下一步....

基础知识:组织学基础知识对于临床病理教学的作用

  临床病理学是一门介于临床与基础之间的重要学科,不仅能为临床各科尤其是外科提供准确的病理诊断,而且能够判断出疾病的进程及预后,对于病人的治疗具有重要的指导作用[1].作为一名病理医生,要拥有这种权威性且不临床医生的信任却并非易事.从一名病理实习生成长为具有丰富经验的临床病理医生,不仅需要经过长期的专业训练,而且需要自身的艰苦努力及上级医生的正确指导....

光动力疗法在某些皮肤肿瘤中的应用

PDT 的基本过程为生物体内的内源性或者外源性 光敏性物质受到相应波长的光(如可见光、近红外光或 者紫外光)照射后,产生大量活性氧,活性氧与体内多 种生物大相互作用,产生细胞毒性作用,进而导致 细胞受损乃至死亡,从而达到治疗目的[1]。 5-氨基酮戊酸(ALA)及其甲基衍生物(MAL)都是 临床上常用的光敏剂。ALA 是生物体的内源性物质, 是动物血红素和植物叶绿素生物合成的前体物质。正 常情况下,机体通过细胞内血红素的含量负反馈 ALA 合成酶,从而控制 ALA 的生成量,使机体不会产生过量的 ALA。...

裂谷热病毒感染宿主细胞机制

  裂谷热病毒是一种布尼亚病毒。1930年,它首次是在肯尼亚的绵羊中分离出来的。裂谷热病毒的扩散给非洲造成严重的经济后果。这种病毒还会导致接触过被它污染的或者被感染的蚊子叮咬的动物的人患上严重的疾病,从而导致致命性的重症脑炎和出血热。因此,裂谷热病毒也是一种重大的公共卫生。在2000年,这种病毒扩散到非洲之外的沙特阿拉伯和也门。有人担忧它可能也扩散到亚洲和欧洲。...

免疫检测分析:化学发光免疫测定

化学发光免疫测定(Chemiluminescent immunoassay,CLIA)是将抗原与抗体性反应与性的化学发光反应相结合而建立的一种免疫检测技术....

抗体抗原实验:抗体的酶标记法

  抗体的酶标记法是应用偶联剂使酶与抗体结合.即通过应用单、双或多功能基试剂,分别与大的抗体所存在的功能性基团发生反应,生成酶-抗体偶联复合物.不同的酶-抗体复合物制备方法中,最广泛应用的是第一步加入戊二醛的方法,本法与其它偶联方法相比,具有操作简单、反应条件温和,及实用面广等长处....

实验动物基础:小鼠生物学特性和解剖生理特点

  3.体形小,易于饲养管理.小鼠是啮齿目实验动物中较小型的动物,一只小鼠出生时1.5克左右,哺乳一月后可达12~15克,哺乳、饲养1.5~2月即可达20克以上,可供实验需要,在短时间内可提供大量的实验动物.饲料消耗量少,一只成年小鼠的食料量为4~8克/天,饮水量4~7毫升/天,排粪量1.4~2.8克/天,排尿量1~3毫升/天,需要的饲养条件也较简单,因个体小,可节省饲养场地....

饲养:家兔饲养管理三注意

  夏季中午炎热,兔食欲不好.因此,每天应早餐要早,晚餐要晚,中餐多喂青绿饲草,同时供给清洁饮水,并在水中加入1%的食盐,既补充体内盐分消耗,又有利于防暑解渴.要特别注意饲料卫生,禁喂霉变饲草.青草最好经过晾晒再喂,并在精料中掺入适量切碎的洋葱、大蒜、韭菜等,以防兔肠炎和球虫病的发生....