根据肿瘤细胞比成纤维细胞贴壁速度慢的特点,并结合使用不加血清的营养液,把含有两类细胞的细胞悬液反复贴壁,使两类细胞相互分离,操作方法与传代相同....

　　普通冰箱、-30℃低温冰箱和-70℃～-80℃超低温冰箱、液氮冻存罐、高速离心机、电子计算机程控降温仪等;...

　　1.MSP：DNA经亚硫酸氢钠处理后，所有未甲基化的胞嘧啶发生脱氨基变为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶无此改变。DNA的甲基化差异转变为序列差异，设计两对分别针对甲基化与非甲基化等位基因的引物，结合PCR扩增就可以将甲基化与非甲基化等位基因区分开。这种方法灵敏度高，对DNA的质和量需要少。...

1. 模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；...

　　这个絮状的东西有颜色吗,会不会是染菌了,或者是脏的东西没有处理干净,你可以用0.5MNaoH泡半小时,沉淀后倾去上清,做三次这样的处理,如果还有不干净的东西,你可以用6M盐酸胍泡半个小时,然后处理和NaoH一样,再换水,这样你看能不能洗回来,如果不能很好沉淀下来,那就不能用了.凝胶类的填料很容易长菌,用完得洗干净,保存在20%的乙醇中....

　　离子交换纯化是利用离子交换剂上的可解离基团(活性基团)对各种离子的亲和力不一样人达到分离的目的的一种分离技术.离子交换剂是含有若干活性基团的不溶性物质,即在不溶性母体上引入若干可解离基团而成,根据引入解离基团的不同,可以分为阳离子交换剂和阴离子交换剂.各种离子对离子交换剂的亲和力各不相同,亲和力随离子的价数与原子序数增加而增加,而随离子水化膜半径的增加而降低.对具体离子交换纯化,需要主要离子交换剂的选择和处理.洗脱不同蛋白的最恰当的离子强度液不一定一样,通常采用浓度梯度和PH梯度相结合的方式洗脱,纯化...

从琼脂平板上挑取一个单菌落,接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长),然后从中纯化质粒,质粒的提纯几乎总是如此.现在使用的许多质粒载体(如pUC系列)都能复制到很高的拷贝数,惟致只要将培养物放在标准LB 培养基中生长到对数晚期,就可以大量提纯质粒.此时,不必性地扩增质粒DNA.然而,较长一代的载体(如pBR322)由于不能如此地复制,所以需要在得到部分生长的细菌培养物中加入氯霉素继续培养若干小时,以便对质粒进行性扩增.氯霉素可宿主的蛋白质合成,结果了细菌染色体的复制,然而,松弛型质粒仍可继续复...

从琼脂平板上挑取一个单菌落,接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长),然后从中纯化质粒,质粒的提纯几乎总是如此.现在使用的许多质粒载体(如pUC系列)都能复制到很高的拷贝数,惟致只要将培养物放在标准LB 培养基中生长到对数晚期,就可以大量提纯质粒.此时,不必性地扩增质粒DNA.然而,较长一代的载体(如pBR322)由于不能如此地复制,所以需要在得到部分生长的细菌培养物中加入氯霉素继续培养若干小时,以便对质粒进行性扩增.氯霉素可宿主的蛋白质合成,结果了细菌染色体的复制,然而,松弛型质粒仍可继续复...

　　细胞内的DNA含量随细胞周期进程发生周期性变化,如G0/G1期的DNA含量为2C,而G2期的DNA含量是4C.利用PI标记的方法,通过流式细胞仪对细胞内DNA的相对含量进行测定,可分析细胞周期各时相的百分比....

石蜡切片：组织取材、固定、包埋,切片(一般的组织化学染色切片厚度要求5～7 µm,常规病理切片2～3 µm)...

　　(三)饲养人员在进入屏障前,应在外室脱去外衣,除下手表、手机、饰品等物品,换拖鞋,洗手(眼镜).后进入内室,穿戴净化衣、帽、口罩、手套,换拖鞋.拉开风淋室外门,人员进入后,立即关闭外门,风淋自动启动1分钟(已设置),进入清洁走廊....

　　传统成像大多依赖于可见的身体、生理和代谢过程在疾病状态下的变化,而不是了解疾病的性事件.成像则是利用性探针追踪靶目标并成像.这种从非性成像到性成像的变化,为疾病生物学、疾病早期检测、定性、评估和治疗带来了重大的影响....

先天性泌尿生殖系统缺陷是最常见的出生缺陷类型之一，其原因一直是 Dolores Lamb 博士实验室多年研究的焦点。...

　　循环肿瘤细胞（circulating tumor cells ，CTCs）对于肿瘤的转移起到了重要的作用，也一直是癌症治疗的一大挑战。虽然近年来科学家们开发了各种致力于使人体摆脱原发性肿瘤的技...

　　酶切位点一般都是直接按照载体能够使用的添加。都只是在引物的5’端直接加上酶切位点，然后再添加几个碱基。你上网查一下，一般的碱基添加都有。你说的确实是一个问题，就是5’端和三段的方向性问题。所有最好是用双酶切。如果实在只能单酶切，那就只能通过测序确定哪个连接是正确的。...