质粒提取：聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA
PEG/ MgCl2 沉淀法与用柱层析和CsCl-溴化乙锭平衡离心纯化质粒DNA的主要区别在于：他不能有效分离带缺口的环状质粒和闭合的环状质粒.后两种方法用于纯化易产生缺口的特大质粒(>15kb)和用于生物物理测量的闭合环状质粒是首选.不过,用PEG/ MgCl2 沉淀法纯化的治理不仅可用于所有克隆中的酶学反应(包括DNA测序),还可用于高效转染哺乳动物细胞....
血友病基因疗法恢复因子 VIII 水平，挺进临床 3 期
今天，BioMarin Pharmaceutical 宣布其以前报告过的针对在研新药 BMN 270 的临床中期结果的数据更新，该基因疗法用于治疗重度 A 型血友病。 在这项标签的 1 / 2 期研究...
免疫组化：免疫组化实验指导
(2)煮沸热修复电炉或者水浴锅加热0.01M枸橼酸钠缓冲溶液(pH6.0)至95℃左右,放入组织芯片加热10~15分钟....
免疫检测分析：胶体金免疫层析法在乙型肝炎病毒表面抗原检测上的应用
免疫层析技术是90年代初在免疫渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术，由Beggs等最先用于人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测定，后来由胶体金代替胶体硒用于乙型肝炎(以下简称乙肝)病毒表面抗原(HBsAg)等检测。我们用胶体金标记单克隆乙肝病毒表面抗体(抗 HBs)，制成检测HBsAg的胶体金免疫层析法(GICA)检测试条。用该法检测HBsAg，其灵敏度与酶免疫法(EIA)相近，并具有简便快速、性好、不需要仪器设备等优点。...
实验动物基础：实验动物组织的放射性排序
可用猴震颤动物模型筛选抗震颤性的药物.猴对镇静剂的依赖性与人较接近,戒断症状较明显并易于观察,新镇静剂进入临床前要用猴进行实验....
实验动物基础：灵长类在生物学研究中的应用
可用猴震颤动物模型筛选抗震颤性的药物.猴对镇静剂的依赖性与人较接近,戒断症状较明显并易于观察,新镇静剂进入临床前要用猴进行实验....
细胞培养：小鼠胚胎干细胞四倍体胚胎嵌合
②电融合：电融合仪采用Eppendorf公司产品(Multiporator)，电融合模式设为II型，首先将受精二细胞胚胎用电融合液清洗至少3遍，然后将二细胞依次排列在电融合槽内两个电极之间，每次排列约排列15-20个胚胎，点击开始按钮后，完成电融合过程;将进行电融合操作后的胚胎用HCZB清洗至少三遍以上，放入CZB培养液中培养，(37℃，5% CO2)，电融合槽要用蒸馏水至少清理5遍以上;电融合结束后一个小时观察融合结果;将融合的胚胎，继续培养，约培养48小时至54小时后，即可发育成四倍体囊胚，用于四倍体...
Horizon Discovery 公司RNA基因检测标准品获Thermo Fish力荐用于癌症研究检测！
准确的诊断测试是完成精准治疗的关键组成部分，也是避免检测假阳性/假阴性结果的关键因素。Horizon Discovery 公司CEO Darrin M Disley博士表示， “在Thermo Fisher发表的中，合作伙伴Thermo Fisher公司高度肯定了Horizon Discovery提供的高质量参考标准，并且认为Horizon Discovery在检测标准品企业中处于全球领导地位。”...
实时荧光定量PCR进展及其应用
在real-time Q-PCR中，对整个PCR反应扩增过程进行了实时的监测和连续地分析扩增相关的荧光信号，随着反应时间的进行，监测到的荧光信号的变化可以绘制成一条曲线。在PCR反应早期，产生荧光的水平不能与背景明显地区别，而后荧光的产生进入指数期、线性期和最终的平台期，因此可以在PCR反应处于指数期的某一点上来检测PCR产物的量，并且由此来推断模板最初的含量。为了便于对所检测样本进行比较，在real-time Q-PCR反应的指数期，首先需设定一定荧光信号的域值，一般这个域值（threshold）是以P...
PCR技术：PCR实验室的建立
必须有专门用于准备各种反应的区域,这个区域必须保持干净,而且没有来自克隆和样品准备的污染.前PCR区必须要有试剂和准备,特别是专门用于前PCR区的正压活塞式移液管.1、PCR实验室试剂的操作:...
蛋白分离纯化：蛋白质纯化经验指南（6）
首先谢谢你的答复.第一步柱子是去掉大部分与conA结合的蛋白,然后在上的交换柱,文献上基本上都这样,而且电泳显示确实去掉了很多的蛋白.不过我将试试直接上离子柱的效果....
Western-blot： Western-blot
仪器：高压锅、玻璃匀浆器、高速离心机、分光光度仪、—20℃低温冰箱、垂直板电泳转移装置、恒温水浴摇床、多用脱色摇床....
张锋教授Nature子刊发文：编辑人类基因组需谨慎！
先简单介绍一下CRISPR基因编辑技术的原理。这一技术需要两类关键，一类是能够剪切DNA的酶（如Cas9和Cpf1），另一类则是负责将这些酶带到特定区域的向导RNA（gRNA）。在这两类的作用下，CRISPR系统能有效地对研究人员选定的基因组位点进行高效、精准的剪切，使得基因组编辑的大规模应用成为可能。人们畅想，使用CRISPR基因编辑技术，我们或许很快就能修复患者的基因，使他们健康生活。...
武汉病毒所朊病毒致肿瘤恶性研究获新进展
近年来，多项研究表明，朊病毒蛋白 PrP 在多种肿瘤中出现高表达并与胰腺癌、胃癌和乳腺癌患者的预后呈现关联。阐明朊病毒蛋白如何促进肿瘤恶性是理解该蛋白作为预后差的生物学标记的基础。通过对恶性黑色素瘤细胞株 M2 和胰腺癌细胞株 BxPC3 的研究，该课题组发现细胞膜表面的朊病毒蛋白可以结合去泛素化酶 CYLD。在肿瘤坏死因子（一种能够直接杀伤肿瘤细胞而对正常细胞无明显毒性的细胞因子）处理的条件下，CYLD 和朊病毒蛋白的结合能力增强，从而减少 CYLD 和肿瘤坏死因子复合体中 RIP1 和 TRAF2 的...
ELISA：ELISA的操作要点
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是ELISA检测结果准确可靠的必要条件.ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点.本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照操作,必能得出准确的结果....