细胞培养：细胞培养中的一些试剂
在培养中使用的纺锤体阻断剂为秋水仙素,在终止培养前加入适量秋水仙素,使正在的细胞停留在中期,以获得大量相供分析之用.秋水仙素的浓度范围比较宽,一般使用浓度0.05—0.8微克/毫升,在终止培养前处理2—4小时.但在实际工作中需要借助浓度和处理时间来控制染色体的收缩程度.秋水仙素作用时间越长,被阻断的中期相越多,但是染色体也越凝聚和收缩,所以还视各实验室经验而定....
20-HETE：癌细胞“扩散转移”的关键
本地化肿瘤比较容易治疗，的几率也更大。然而一旦肿瘤扩散，控制起来就变得难上加难。了解肿瘤转移是一个重要的研究领域，麻烦的是，癌症非常善于寻找新的。事实上，肿瘤细胞不断在血液中发出信号，寻找适合的。新的研究，着眼于一个名为20-HETE的代谢物，首先，20-HETE是花生四烯酸的分解产物，这是广泛应用于身体的脂肪酸，20-HETE担任着很多有用的角色，包括血管张力的调节，血液流向器官，肾脏的运输角色，同时也帮助身体抵御感染和其他炎症疾病。除了它的自然和积极作用之外，20-HETE似乎也存在着的一面。对于它的...
增加PCR的保：高保真酶、酶的混合物及其他因素
a. 5-3方向的DNA合成能力,没有3-5方向的外切酶特性.如Taq及其突变体.这类酶的合成能力强,因为他不纠正合成中出现的突变...
PCR技术：PCR 引物设计的原则和要点
的序列要紧密互补,其次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构,再次引物不能在模板的非目的位点引发1、引物的长度一般为15-30bp,常用的是18-27bp,但不应大于38,...
蛋白分离纯化：醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白
醋酸纤维素薄膜电泳(cellulose acetate membrance electrophoresis)以醋酸纤维薄膜为支持物.它是纤维素的醋酸酯,由纤维素的羟基经乙酰化而制成.它溶于丙酮等有机溶液中,即可涂布成均一细密的微孔薄膜,厚度以0.1mm—0.15mm为宜.太厚吸水性差,分离效果不好;太薄则膜片缺少应有的机械强度则易碎....
蛋白提取：蛋白质提取方法大全
2、加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下过夜,然后离心(4℃8000rpm以上1小时)弃上清....
小核糖核酸的“基础研究”，癌症免疫治疗新方向
最近麻萨诸塞大学阿默斯特分校（University of Massachusetts Amherst）的生物学家 Leonid Pobezinsky 博士与他的妻子 Elena Pobezinskaya 博士，发现 microRNA 也具有调控免疫细胞活性之功能，并且会 T 细胞毒杀癌细胞的能力。Pobezinsky 博士说：“当我们将 T 细胞中一种称为 let-7 的 microRNA 移除后，他们毒杀癌细胞的能力显著上升。”这项新发现将有助于癌症免疫治疗之发展。该研究已刊登于今年 7 月的《eLif...
DNA提取与纯化：质粒DNA的性内切酶酶切及琼脂糖凝胶电泳分离、鉴定
目前已发现的性内切酶有数百种.EcoRⅠ和Hind Ⅲ都属于Ⅱ型性内切酶,这类酶的特点是具有能够识别双链DNA的核苷酸顺序的能力,能在这个性核苷酸序列内,切断DNA的双链,形成一定长度和顺序的DNA 片断.EcoRⅠ和Hind Ⅲ 的识别序列的切口是: EcoRⅠ:GAATTC Hind Ⅲ:AAGCTT...
抗体抗原实验：常用抗体的应用范围及选用
某些抗原不是在任何时候能表达出来的它们需要一定的时间和条件.有人根据肿瘤细胞增生的能力将其分为三个阶段:...
抗体抗原实验：抗体和重组蛋白的使用及保存方法
无论是保存还是运输，请避免反复冻融。反复冻融，冰晶会抗体和重组蛋白的空间结构，导致蛋白变性形成多聚体和重组蛋白构象改变，从而降低抗体的结合能力，也加快了抗体球蛋白和重组蛋白的降解速度。抗体和重组蛋白保存得当与否，直接决定了抗体和重组蛋白的活性使用效果，如果保存得当，Immune tech的抗体和重组蛋白活性大部分都可以维持数年。...
实验动物基础：哺乳类实验动物的遗传质量控制
近交系一般以大写英文字母命名,亦可以用大写英文字母加阿拉伯数字命名,符号应尽量简短.如A系、TA1系等....
实验动物解剖：急性动物实验中常用的手术方法
颈部手术的目的在于气管、颈部血管并作相应的插管以及分离神经等.颈部手术成败的关键在于熟悉动物颈部及手术要领,防止损伤血管和神经(图1)现以兔为例,说明如下：...
Nature子刊：新型细胞成像技术或助力癌症疗法的开发
上的研究报告中，来自约克大学和莱顿大学的研究人员通过研究开发了一种新技术，利用荧光成像来追踪多种疾病种关键酶类的活动，包括癌症、遗传性疾病和肾脏疾病。这项新技术或...
细胞培养：细胞生长状况有关指标的检测方法
台盼蓝染色法可计算出活细胞和死细胞数以测定细胞存活百分率.一般0.5%-1.0%的台盼蓝染液可使死细胞染成蓝色,活细胞不着色.此外还可用0.02%的藻红b染液将死细胞或受损细胞染成红色,或用0.05%的苯胺黑染液将死细胞染成黑丝....
PCR技术：PCR污染及解决对策
目前,普通PCR尚不能做到单人单管,实现完全闭管操作,但无论是否能够达到单人单管,均要求实验操作在三个不同的区域内进行,PCR的前处理和后处理要在不同的隔离区内进行:1、标本处理区,包括扩增摸板的制备;2、PCR扩增区,包括反应液的配制和 PCR扩增;3、产物分析区,凝胶电泳分析,产物拍照及重组克隆的制备.各工作区要有一定的隔离,操作器材专用,要有一定的方向性.如:标本制备→PCR扩增→产物分析→产物处理.:产物分析区的产物及器材不要拿到其他两个工作区....