PCR技术：PCR 污染解决对策
二、追踪污染源如果不慎发生污染情况,应从下面几条出发,逐一分析,排除污染.(一) 设立性对照：有利于监测反应体系各成分的污染情况.选择阳性对照时,应选择扩增弱,且重复性好的样品,因强阳性对照可产生大量不必要的扩增序列,反而可能成为潜在的污染源.如果以含靶序列的重组质粒为对照,100个拷贝之内的靶序列就足以产生阳性扩增.阴性对照的选择亦要慎重,因为PCR性极高,可以从其它方法（Sourthern 印迹或点杂交等）检测阴性的标本中检测出极微量的靶.此外,每次扩增均应包括PCR体系中各试剂的时机对照,即包括PC...
基础知识：生物大样品的保存
空气的影响主要是潮解、微生物污染和自动氧化.空气中微生物的污染可使样品变质,样品吸湿后会引起潮解变性,同时也为微生物污染提供了有利的条件.某些样品与空气中的氧接触会自发引起游离基链式反应,还原性强的样品易氧化变质和失活,如维生素C、巯基酶等....
蛋白分离纯化：细菌总蛋白和膜提取方法
3) 超声粉碎，采用300w，10s超声/10s间隔，超声20min，反复冻融超声3次至菌液变清或者变色。...
DNA提取与纯化：大白鼠肝DNA的提取与鉴定
三、材料（一）仪器研钵；研钵棒；刻度离心管；普通离心机；小试管；Ep管（二）试剂1、生理盐水；2、裂解缓冲液；3、苯酚：氯仿混合液（1：1）；4、无水乙醇；5、70％乙醇；6、TE缓冲液；7、溴酚蓝载样液；8、溴乙锭溶液；9、TBE缓冲液...
数亿糖尿病患者！这张创可贴能巧妙监测血
目前最常见的血糖水平的方法仍然是扎手指取血。显然这种传统的血糖检测方法对锻炼中的糖尿病患者来说并不方便。谁愿意在跑步、打球的时候还要带着一套酒精棉、针头、试纸和血糖仪呢？而且锻炼时皮肤上汗液中的成份有可能影响试纸检测血糖的准确性。虽然现在的血糖仪做得越来越小巧了，但是需要电池供电的血糖仪在小型化方面似乎也达到了瓶颈。那么有没有一种方法能够让锻炼中的糖尿病患者简便准确地自己的血糖水平呢？...
免疫组化：免疫组化常见问题的处理
③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗匹配,这一点常重要的.比如,如果一抗是兔来源的抗体,二抗一定要用抗兔的二抗来匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必须是山羊/兔抗小鼠的IgM(不是IgG)二抗....
基础免疫实验：病毒蚀斑技术介绍
1952年,Dulbecco把噬菌体空斑技术应用于动物病毒学,从而使病毒蚀斑技术(Virus plaque formation)成为许多病毒的滴定和研究方法....
饲养：实验动物饲养的辅助设施和设备
在笼外的符合质量控制标准的情况下,包围动物小的质量很大程度取决于笼具、笼架的情况.笼具要求能对动物提供足够的活动空间,通风和采光良好;坚固耐用,里面的动物不会逃逸,外面的动物不会闯进;操作方便,适合于消毒、清洗和储运;成本低廉,经济实用.现在国内已有多家厂商,生产各种式样和质量档次的笼具....
实验动物基本操作：大鼠水合氯醛麻醉经验总结
现在由于实验方案有所改动,希望麻醉的时间尽量缩短（1~1.5h）,而麻醉深度保持不变,这样在侧脑室注射操作后,大鼠能够尽快的恢复状态,便于后续的实验操作.因此,对水合氯醛麻醉的剂量与药效进行了摸索,我把它贴出来,跟大家分享一下....
单细胞可变剪接分析神经分化中的剪接动态
为了满足此种需求，Gene yeo的研究者们根据如下3项进行设计：1）既要能准确鉴别可变剪接，又要确保注释和观测数据的兼容性；2）对AS的变化和分布进行描述；3）从一个细胞或状态到另一个之间AS分布和动态的可视化。最终他们创建了Expedition软件包（outrigger/anchor/bonvoyage），能够鉴别并量化单细胞RNA-seq数据中的AS、对剪接形式进行分类、并将形态变化可视化。...
JCI：对伏立诺他进行间隔给药可逆转HIV潜伏性
地址：陕西省西安市灞桥区新寺569号唐都医院临床教学楼312室 邮箱： 联系电话 传线号 技术支持：陕西奈特星网络发展有限公司...
PCR常见问题及解决方案
模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶剂，③模板中蛋白质没有消 化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚。⑤模 板核酸变性不彻底。在酶和引物质量好时，不出现扩增带，极有可能是标本的消化处 理，模板核酸提取过程出了毛病，因而要配制有效而稳定的消化处理液，其程序亦应 固定不宜随意更改。...
PCR技术：mRNA差异PCR技术
以往，研究基因表达差异的主要方法是双向蛋白质电泳指纹图谱和依赖杂交的筛选技术。这两种技术各有自己的适用范围和优点。蛋白质指纹技术具有很高的灵敏度，可以很方便地区分出不同的表达产物，但往往得不到足够的量来分析和克隆它们的基因；而杂交技术则需要较长的周期和繁琐的步骤，也易发生基因的丢失。所以多年以来，人们一直想找出一种更方便有效的替代方法。...
蛋白质修饰：蛋白质机构（空间结构）预测－从头预测法
从头预测方法一般由下列3个部分组成：(1)一种蛋白质几何的表示方法：由于表示和处理所有原子和溶剂的计算开销非常大,因此需要对蛋白质和溶剂的表示形式作近似处理,例如,使用一个或少数几个原子代表一个氨基酸残基;(2)一种能量函数及其参数,或者一个合理的构象得分函数,以便计算各种构象的能量.通过对已知结构的蛋白质进行统计分析,可以确定蛋白质构象能量函数中的各个参数或者得分函数;(3)一种构象空间搜索技术：必须选择一个优化方法,以便对构象空间进行快速搜索,迅速找到与某一全局最小能量相对应的构象.其中,构象空间...
蛋白提取：蛋白质抽取
仪器用具：恒温震荡培养箱37℃;高速冷冻离心机及离心管 (使用20,000 rpm离心陀)使用高速离心机要注意： 离心机及离心陀的温度要预冷完全,相对的两只离心管要平衡好,离心陀转速绝对不能超过最高速限;液态氮及冰筒;37℃温水浴...