质粒提取：SDS碱裂解法制备质粒DNA：小量制备
9、用 2 倍体积的乙醇于室温沉淀核酸,振荡混合,于室温放置 2min .10、用微量离心机与 4 ℃以最大转速离心 5min ,收集沉淀的核酸.最好养成总是用同一种方法在离心机中放置离心管的习惯,例如,按顺序放置,将离心管的塑料柄朝外.沉淀总是在离转头中心最远的离心管内壁聚集.知道 DNA 沉淀在什么地方可以较容易地找到可见的沉淀,也就能有效地溶解看不见的沉淀.在离心管的侧面及顶部都做好标记,这样即使字迹模糊了也能辨识各管.11、按上述步骤 3 所述小心吸取上清液,将离心管倒置在纸巾上,以使所有液体流出...
DNA提取与纯化：胸腺DNA的制备
和植子的胚等含有丰富的DNA，可作为提取DNA的良好材料。动物和植物组织的脱氧核糖核蛋白可溶于水或浓盐溶液（如1mol/L氯化钠溶液），但在0.14mol/L盐溶液中的溶解度很低，而核糖...
免疫组化：caspase3转染空载体和转染Emx2表达载体的结果
免疫组化分析caspase3在转染空载体的小鼠子宫内膜和转染Emx2表达载体的小鼠子宫内膜中的表达...
免疫组化：免疫组化分析hK6蛋白在人类子宫内膜癌中的表达
染色结果显示,hK6蛋白在子宫内膜肿瘤中有表达,如箭头所示,阳性应该定位于子宫腺上,为棕....
实验动物模型：诱发性肿瘤动物模型
甲基胆蒽诱发小鼠胃癌：取20g左右的小鼠,无菌手术下,在腺胃粘膜面穿挂含甲基胆蒽(MC)线结.含MC的线结是用普通细线,在一端打结后,将线结置于盛 有MC小玻璃试管内,在酒精灯上微微加温,使MC液化渗入线根线个月可诱发成功胃癌.用不对称亚硝胺,剂量为0.25ml/kg体重,3个月后全部动物发生前胃乳头状癌,7～8个月后有85～100%发生前胃癌.昆明种最.A系次之,615系小鼠性最差.此外还可用甲基亚硝基醋酸尿素给BD大鼠饮水中加2mg/kg体重,每周5次饮用,520天后全部大鼠均发生了腺胃癌....
实验动物基本操作：常见实验动物处死方法的选择
先使动物轻度麻醉,如狗可按每公斤体重静脉注射硫喷妥钠20～30mg,动物即很快入睡.股三角区,用锋利的杀狗刀在股三角区作一个约10厘米的横切口,把股动、静脉全切断,立即喷出血液.用一块湿纱布不断擦去股动脉切口周围处的血液和血凝块,同时不断的用自来水冲洗流血,使股动脉切口保持畅通,动物在3～5分钟内即可.采用此种方法,动物十分安静,对脏器无损伤,对活杀采集病理切片标本是一种较好的方法....
Stem Cell Reports：上海药物所利用单因子及小化合物肝细胞转分化
中国科学院上海药物研究所谢欣课题组一直致力于小化合物体细胞重编程及转分化的研究，两年前报道了包含BrdU在内的小化合物组合可以实现全化学ipsCs（Cell Research，2015；25(10)：1171-4），并利用3-6个小化合物的组合成功实现了小鼠胚胎成纤维细胞向心肌细胞的转分化（Cell Research，2015；25(9)：1013-24）。近期，该实验室又发现利用小化合物组合可以使小鼠成纤维细胞在一个因子条件下即可向肝细胞转分化。这些转分化获得的肝细胞样细胞在体内外均具有肝细胞特征，并可...
100%受试患者出现症状改善！美国公布干细胞疗疗帕金森取得积极临床结果。
接受干细胞移植后6个月，100%的患者情绪出现好转，同时贝克抑郁量表（Beck Depression Inventory）的平均改善值为35%，帕金森患者生活质量问卷（PDQ-39）中的情绪维度出现了平均33%的改善。...
PCR-聚合酶链反应的进展
迄今各种PCR的实验方法虽然有一些改进变化，但是基本原理是一致的。PCR的主要产物是双链DNA，在目的基因两端设计了两条性的引物，引物的5’末端限定了扩增的目的序列的长度，其长度等于两引物间的距离。在PCR过程中，第一循环扩增产生的DNA大小是不均一的，其长度可以超出两个引物结合部位间距离。在第二循环后，以第一循环产物为模板所扩增出的DNA的长度便固定了，并在以后的循环中以成倍速度积累，成为PCR的产物尽管在每一循环中，以起始的DNA为模板所产生的较长片段的产物也仍在不断的扩增，但它们是以...
PCR技术：PCR问题的总结
需更换新酶,或新旧两种酶同时使用,以分析是否因酶的活性或不够而导致假阴性.需注意的是有时忘加taq酶或溴乙锭.引物...
蛋白表达：Pichia酵母表达系统使用
3.酵母培养、、高密度发酵等操作接近原核生物,远较真核系统简单,非常适合大规模工业化生产. +++ =...
蛋白分离纯化：磁性微球在蛋白质和多肽的分离与纯化上的应用
要从全血,培养上清液,血清,腹水中分离蛋白质,用于制备、分析,运用磁珠作为固相载体进行免疫测定的优点在于快速的结合动力学和简单的分离,洗涤过程.在蛋白质纯化中,为了得到高结合容量需使用大孔如粒径为3.5μm,并用链霉亲和素修饰的磁珠,生物素修饰的免疫球蛋白(IgM)可顺利结合到磁珠上.键合配基的活性不会因孔结构而改变....
经常感冒竟然是由于基因突变？
由于这些频繁的感染，她的医生怀疑她的免疫系统午饭正常运作，因此医生检查了她的基因组测序，看看是否能找到解释她症状的基因。...
elife：不同组织间的基因活性存在显著差异
然而，最近一项研究则提出了不同的见解。通过对小鼠23类不同部位或分化阶段的组织进行系统性的分析，研究者们发现每一种组织中都存在性的等位基因活性图谱。...
基础免疫实验：性循环免疫复合物的测定
性CIC分为单性CIC和双性CIC两类.前者适用于检测已知抗原及其相应抗体组成的CIC.双性CIC是指对组成CIC的抗原、抗体和补体中某两种成分组合明确的CIC,常采用的检测方法为ELISA和RIA技术,需要两种性各异的抗体.因此,检测要求条件较高,但能较全面地反映CIC的病理意义....