Native-PAGE:Native gel electrophoresis

(1)取2支试管分别加入蛋白质溶液和甘氨酸溶液1毫升,再各加0.5毫升0.1%茚三酮溶液,混匀,在沸水浴中加热1—2分钟,观察颜色是否由粉红色 变紫红色再变蓝色....

蛋白质含量测定:蛋白质及氨基酸的颜色反应

(1)取2支试管分别加入蛋白质溶液和甘氨酸溶液1毫升,再各加0.5毫升0.1%茚三酮溶液,混匀,在沸水浴中加热1—2分钟,观察颜色是否由粉红色 变紫红色再变蓝色....

蛋白质含量测定:紫外分光光度法测定蛋白质含量

牛血清蛋白标准溶液(1000ug/ml)的制备 称取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中,加入超纯水溶解并定容....

SDS-PAGE:SDS-PAGE注意事项

2. 用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对量时,必须同时作标准曲线.不能利用这次的标准曲线作为下次用.并且SDS-PAGE测定量有10%误差,不可完全信任....

Nature:NLGN3蛋白缺乏可高分级神经胶质瘤生长

期刊上,论文标题为“Targeting neuronal activity-regulated neuroligin-3 dependency in high-grade glioma”。...

原创简析金属螯合亲和层析的应用进展

  固定化金属螯合亲和层析在生物纯化方面具有很多优点:(1)与蛋白结合力强、容量大,可用于工业生产;(2)洗脱条件温和,纯化过程不会改变靶蛋白的功能活性;(3)使用寿命长,通过清洗-再生可以长期反复使用;(4)选择性多,根据实际情况筛选最适宜的分离纯化条件(选择不同的纯化介质或螯合不同的过渡金属离子)。...

蛋白质修饰:蛋白质机构预测方法的分析与评价

  对蛋白质结构预测的同源模型化方法、线索化方法和从头预测方法实验测试和评价,结果表明:(1)在同源模型化方法中,得到一个好的序列比对是该方法的关键.当目标蛋白质与模板等同部分超过60%时,完全可以找到正确的比对.然而如果序列相似程度只有20-25%,则很难找到正确的比对.如果相似程度低于20%,则同源模型化方法几乎为力,因为在这种情况下,很难或无法找到合适的模板.(2)对于线索化方法,如果能够找到同一家族远程同源蛋白质,则可以获得比较好的预测结果.如果找到的模板属于不同的家族,则预测准确性难以.(3)对...

2D电泳技术:双向电泳的实验过程

  取纯化后的晶体蛋白3.0mg,加入300ul裂解液(1mg蛋白:100ul裂解液)振荡器上振荡10min左右,共处理一个小时。其中每隔10~15分钟振荡一次,然后13200rpm离心15min除杂质,取上清分装,每管70ul,-80oC保存。...

蛋白质含量测定:2.5 蛋白质和氨基酸的需要量

  人类对蛋白质需要量的研究,虽已有100多年的历史,但理论上的发展缓慢.50年代前后,Rose等人对人体各种必需氨基酸需要量进行了一系列的测定,以后国联和联合国曾多次召集专家讨论和修订蛋白质和氨基酸的需要量,有关的研究工作至今仍在进行中....

蛋白质含量测定:蛋白定量技术

⑴ 准确称取牛血清白蛋白1.0g(必要时须首先采用凯氏定氮法测定牛血清白蛋白制品中实际纯蛋白含量,然后换算),以生理盐水配成1%的浓度....

2D电泳技术:双向电泳完整的操作步骤

  5.沿着聚焦盘或水化盘中槽的边缘至左而右线性加入样品.在槽两端各1cm左右不要加样,中间的样品液一定要连贯.注意:不要产生气泡.否则影响到胶条中蛋白质的分布....

蛋白质修饰:基于氨基酸组成的蛋白质预测软件

AACompIdent:与把氨基酸序列在SWISS-PROT库中搜索不同,AACompIdent工具利用未知蛋白的氨基酸组成去确认具有相同组成的已知蛋白.该程序分析时需提交的相关信息包括:蛋白质的氨基酸组成、等电点pI和量(如果知道)、正确的分类及特别的关键词.此外,用户还需在六种氨基酸“组合”中作出选择,这影响到分析如何进行.例如,某种“组合”会把残基Asp/Asn(D/N)和Gln/Glu(Q/E)组合成 Asx(B)和Glx(Z);或者某种残基会在分析中被完全除去....

蛋白质含量测定:紫外吸收法测蛋白质含量

  紫外吸收法简便、灵敏、快速,不消耗样品,测定后仍能回收使用.低浓度的盐,例如生化制备中常用的(NH4)2SO4等和大多数缓冲液不干扰测定.特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测,因为此时只需测定蛋白质浓度的变化,而不需知道其绝对值....

蛋白质含量测定:蛋白质测定方法之双缩脲法(Biuret法)

  紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量.测定范围为1-10mg蛋白质.干扰这一测定的物质主要有:硫酸铵、tris缓冲液和某些氨基酸等....

2D电泳技术:双向琼脂糖凝胶电泳实验

中性/中性双向凝胶电泳:非线状的DNA 在琼脂糖凝胶中的泳动行为和线状DNA 相比是不规则的.并且这种行为随着琼脂糖浓度或电压增加而加剧.而这正是中性/中性双向凝胶电泳的工作原理:在第一向中,样品在琼脂糖凝胶中以低琼脂 糖浓度、低电压的条件进行电泳,则DNA 主要根据其量大小被分离.在第二向中,则采用高浓度琼脂糖凝胶和较高电压条件,DNA 的分离则主要根据其形状....