ELISA：ELISA方法的基本类型、用途及操作程序Ⅰ
酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA):是酶免疫测定技术中应用最广的技术.其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 )表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除.常用的ELISA法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大抗原,后者用于测定抗体....
ELISA：大鼠TNF-B酶联免疫分析ELISA
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中TNF-B水平.用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入TNF-B、生物素化的抗TNF-B抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色.TMB在过氧化物酶的催化下成蓝色,并在酸的作用下成最终的.颜色的深浅和样品中的TNF-B呈正相关.用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度....
免疫荧光：组织切片制备及染色技术
(1)取材与固定：切取组织时应使用锋利的刀、剪,切取组织块时,从刀的根部开始向后拉动切开组织.组织块的厚度约为0.2~0.3cm,大小为1.5cm x 1.5cm x 0.3cm为宜.取好的组织块用10%福尔马林溶液固定24~48h....
抗体抗原实验：杂交瘤细胞的制备
4、在脾中部切开一小口,用注射器芯从一端轻轻压挤,再用无血清培养液冲洗,令细胞通过纱网,收集入平皿中,或用注射器向脾脏内注入3 ml无血清培养液,反复抽吸数次方法获取细胞,再制成细胞悬液亦可....
基础免疫实验：现代免疫学研究进展概况(90年代至今的研究进展)
人类基因组计划(human genome project, HGP),1985年由美国科学家提出,于1990年正式启动.我国于1994年在陈竺、杨焕明等著名学者的下启动了HGP, 参与测序区域占人类整个基因组的1%....
免疫细胞检测技术：免疫磁珠分选细胞的操作步骤和注意事项
2.用20倍体积PBE洗细胞一次,再加PBE(0.3ml/1×108细胞)充分混悬细胞后,加入相应二抗包被的超微磁珠,混匀后置8~15℃孵育10~15分钟....
免疫检测分析：免疫组化DAB法 显示过氧化物酶
16. 除去,DAB显色10′(在显微镜下观察染色程度控制染色时间).蒸馏水冲洗....
抗体抗原实验：人用单克隆抗体质量控制技术指导原则
SP2/0或其他适宜的骨髓瘤细胞系.应为不合成或不分泌免疫球蛋白链型,具有符合骨髓瘤细胞的染色体特征,并有明确的来源历史及符合要求的保存条件....
基础免疫实验：间接凝集反应原理及分类
载体的存在使反应的性得以大大提高.间接凝集反应的优点为:①性强:间接凝集反应是最性的血清学反应方法之一,可以检测到微量的抗体和抗原;②快速:一般1h～2h即可判定结果,若在玻板上进行,则只需几分钟;③性强;④使用方便、简单....
抗体抗原实验：多克隆抗体的免疫电泳
免疫电泳又称为或免疫球蛋白电泳技术，这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM，IgG，IgA含量水平的实验方法。在这项实验技术中，首先利用蛋白质的量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离，然后将性的抗体引入到与电泳方向平行的凹槽中，在抗原和抗体的扩散过程中，抗原和抗体适当比例的结合会导致沉淀的产生。0.85%盐不仅可以终止扩散过程也可用于洗去未结合的蛋白，抗原和抗体结合所形成的沉淀线即可以观察也可利用染色方法观察。...
免疫细胞检测技术：细胞凋亡的三种流式检测方法
细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间.利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞....
免疫检测分析：均相酶免疫测定
均相酶免疫测定是将半抗原或小抗原如药物、激素、毒品、兴奋剂等与酶结合制成酶标记物,酶与抗原(半抗原)结合后仍保留酶和抗原(半抗原)的活性.测定时将待测样品、酶标记物、性抗体和底物溶液加在一起,待抗原—抗体和酶底物反应平衡后,即可直接测定结果,无需分离步骤,整个检测过程都在均匀的液相内进行.依据实验原理可分为竞争结和非竞争结两种类型....
免疫组化：基因敲除小鼠H-Pgds的表达检测
图A-D为免疫组化检测造血-前列腺素D合成酶在基因敲除小鼠肠粘膜中的表达,阴性对照不添加H- pgds抗体....
基础免疫实验：细胞受体结合免疫测定CIC法
细胞受体结合免疫测定法是根据CIC可与某些细胞表面的Fc受体或补体受体结合而建立的细胞技术,这类方法有灵敏度较高,性较强等优点,但需进行活细胞培养或细胞分离,影响因素多,重复性较差,目前仅适用于实验研究.此类技术有多种方法....
免疫细胞检测技术：淋巴细胞增殖功能的测定
T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝原受体,在性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖.植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA),抗CD2、抗CD3McAb作为多克隆刺激剂可选择性地刺激T细胞增殖;而抗IgM、含葡萄球菌A蛋白的菌体(SAC)、脂多糖(LPS,对小鼠有作用)则刺激B细胞发生增殖;美洲商陆(PWM)、肿瘤刺激剂PMA对T、B细胞的增殖均有刺激作用.最近发现,integrin家族中VLA组中某些受体与相应配体结合后也能活化T细胞.目前临床上最常选用 PHA刺激PBMC,根据形态学或氚...