免疫细胞检测技术：靶细胞杀伤实验：Cr51法
将分离的外周血T细胞, 培养7d后按照DC:T = 1:10的比例分别加入自身细胞致敏DC,细胞系致敏DC及未致敏DC, 继续培养3-4d后收集T细胞, 此即为效应细胞CTL....
免疫检测分析：胶体金免疫层析法对抗幽门螺杆菌相关蛋白A抗体的检测
胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金。胶体金在弱碱下带负电荷，可与蛋白质的正电荷基团形成牢固的结合，由于这种结合是静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。...
基础免疫实验：免疫复合物的测定
由于抗原与抗体比例不同,所形成的IC大小各异,通常有三种形式:一是抗原抗体比例适当时,形成大的不溶性IC(大于19S),易被细胞捕获、和清除.二是抗原量过剩时,形成小的可溶性IC(小于6.6S),易透过肾小球滤孔随尿排出体外.三是抗原量稍过剩时,形成中等大小的可溶性IC(8.8-19S),它既不被细胞清除,又不能通过肾小球滤孔排出,可较长时间游离于血液和其他体液中,又称循环免疫复合物(circulatingimmunocomplex,CIC)....
免疫细胞检测技术：靶细胞杀伤实验：MTT和CCK8比较
WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙的formazan.细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅.对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点.首先,MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液来溶解;而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤.其次,W...
ELISA：酶联免疫吸附实验（ELISA）基本原理
1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法.这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性.②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性.在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体...
抗体抗原实验：抗体的生物素化标记Ⅰ
8.将样品上1ml的筛柱,以PBS缓慢洗脱,收集1ml/管,蛋白质在1-3ml之间洗下;...
免疫检测分析：时间分辨荧光免疫分析技术在HBVM检测中的应用
TRFIA法使用上海新波生物技术有限公司生产的Anytest-2000型时间分辨荧光免疫分析系统及配套试剂.ELISA法使用奥地利BIOELLHTⅡ型自动酶标仪,试剂由标佳生物技术有限公司提供....
ELISA：ELISA常见实验条件
阴性对照的基本组成也应该尽量与检测样本的组成一致,最好先行检测确定其中不含待检物质.比如,检测人血清标本时,阴性对照应该选择正血清;检测免疫动物血清中抗体效价时,阴性对照应该选择该动物的免疫前血清....
免疫细胞检测技术：流式检测凋亡的前提条件
在进一步理化处理(样本制备)下,凋亡细胞易受影响而破损,未凋亡或准凋亡细胞易受影响而发生短暂或永久的凋亡变化.所以制备过程极易造成假阳性和假阴性,又容易形成弱荧光区域严重的不可消隐的延散性干扰.原代分离的实体组织的细胞样本、原代分离培养的细胞样本、贴壁生长的传代细胞样本都很难避免上述情况的出现,即不适合做流式凋亡检测.只有离散组织样本(血细胞)、个别极易分散的组织样本(脾、胸腺等)、悬浮生长且极易分散的细胞样本能满足流式凋亡检测的制备要求.注意,这里说的是所有的在流式上进行的凋亡检测,不存在有的样本不...
免疫检测分析：金免疫技术
金免疫技术是继放射标记、酶标记、荧光标记技术应用以来的一种新检验技术,于1971年由Faulk和Taylor始创,将胶体金与抗体结合,最初用于免疫电镜技术,后来陆续建立了间接免疫金染色法、光镜水平的免疫进染色、免疫金银染色等方法.目前,金免疫技术还应用于金免疫测定中,由于金标记常与膜载体配合,形成特定的测定模式,因此典型的如斑点免疫渗滤试验和斑点免疫层析试验等,已是目前应用广泛的简便、快速检验方法....
免疫检测分析：固相溶血试验
1. 鼻疽抗原、鼻疽阳性及阴性血清、冻干补体鼻疽抗原作1∶5、鼻疽阳性及阴性血清作1∶2、冻干补体作1∶3稀释;...
免疫检测分析：酶联免疫吸附法在饲料安全检测中的应用
酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)是免疫酶一种,是一项先进的免疫化学测定技术.因其具有性高、性强、结果易于检测,是饲料安全检测中某些违禁药品和添加剂,有害微生物的筛检和毒素的检测,是饲料安全检测中一项新的检测技术....
ELISA：常见的原装ELISA试剂盒
最先介绍,非专业人士想不到的食品安全检验ELISA试剂盒,就是指食品中的激素、药物、霉菌毒素、过敏原残留、转基因产品的检测试剂盒,以及微生物、维生素等的检测产品.包括植物病毒、细菌、真菌、植物激素和转基因作物的农业诊断试剂盒以及动植物疾病诊断类如猪、牛、羊、马等家畜和禽类以及宠物类检测试剂盒....
免疫荧光：免疫印迹法的自动化应用进展
前言：免疫印迹法是一种对生物样本中的性蛋白进行检测分析的技术，是检测蛋白性、表达与分布的最常用方法。但是传统操作难以满足实验室高通量，规范化的检测要求。因此为适应临床诊断的需求，新的印迹法技术被不断的探索和发展。欧蒙作为全球血清学诊断领域的领导者，经过多年的探索和完善，提出了一套完整的免疫印迹法检测自动化解决方案，这大大提高了免疫印迹法检测的效率，实现了免疫印迹法检测结果的标准化判读和评估。...
基础免疫实验：免疫染色可能的交叉反应
在免疫染色法中,最大的问题也许是抗体与所研究的蛋白质之外的其他物质发生交叉反应,这是一个非常严重的问题.标本中抗原表位非常复杂,包括细胞内所有蛋白质,而且每种蛋白质可能存在不同的变性程度.固定后抗原的这种特性非常适合于低亲和力反应.这时可以观察到许多蛋白质的局部浓度非常高,因为它们被固定于基质中.局部高浓度的抗原将有助于低亲和力抗体与抗原结合,但同时也增加了交叉反应的可能性.另外,用这种方式固定的,抗原与抗体测试时所使用的抗原在形式上是不同的.所有这些问题,即不同程度的变性显示出的大量抗原表位,使得不...