抗体抗原实验:创建轻链改组噬菌体文库

  以前转载过一篇文章,是介绍:如何选择合适的一抗和二抗,有的客户后续也在询问:这么多生产抗体的公司,如何选择正确的质量比较好的抗体呢?...

抗体抗原实验:如何选择质量好的抗体——PASS原则

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基础免疫实验:直接凝集实验(Direct agglutination react

  颗粒性抗原(细菌、螺旋体、红细胞等)与相应的抗体血清混合后,在电解质参与下,经过一定时间,抗原抗体凝聚成可见的凝集块,这种现象称为凝集反应.血清中的抗体称为凝集素(Agglutinin),抗原称为凝集原(Agglutinogen)....

免疫检测分析:免疫透射比浊法

  当光线通过一个浑浊介质溶液时,由于溶液中存在混浊颗粒,光线被吸收一部分,吸收的多少与混浊颗粒的量成正比,这种测定光吸收量的方法称为透射比浊法.这一方法早于1959年Schultre和Schuick等报道应用于血浆蛋白与其抗体结合后形成复合物,导致浊度的改变,再进行透射比浊测定,一般采用抗体对抗原定量的透射比浊法,称为免疫透射比浊法.其原理是,利用抗原和抗体的性结合形成复合物,通过测定复合物形成量的多少对抗原或抗体进行定量的方法....

抗体抗原实验:抗菌血清的制备

  本实验制备了抗菌血清。抗体是机体接受抗原刺激后产生的一种具有免疫性的球蛋白。在免疫学实践,为制备抗体常以抗原性物质(细菌、病毒、类毒素、血清及其他蛋白质)给动物注射。经过一定时间后,动物血清中可以产生大量的性抗体。这种含有性抗体的血清称为免疫血清。免疫血清不但对传染病的诊断、预防和治疗有重要意义,而且对,肿瘤以及某些科研工作也有重要意义。...

免疫细胞检测技术:关于Western Blot实验的一些小细节和小知识

  缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH.电泳时正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应(4OH--4e->2H2O+O2),负极发生的是还原反应(4H++4e->2H2),长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱.一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,是溶液两极的pH保持基本不变....

免疫细胞检测技术:细胞内细胞因子的流式细胞仪检测

随着研究的进展,仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要.在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比.目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括:ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、性稀释分析(limiting dilution analysis,LDA)和单细胞PCR,应用原位杂交技术和免疫组化方法观察细胞因子蛋白表达及mRNA表达可以识别Th1和Th2细胞,此方法可获得较强的细胞内信号,但此方法工作量大、主观性强,难以进行大样本检测,且人识别能力有很大的局...

免疫检测分析:E 玫瑰花环形成试验的原理及方法

正外周血中T 细胞在体外能直接和绵羊红细胞(SRBC)结合形成玫瑰花样细胞团。这是因为人的T细胞膜上具有能和SRBC 膜上的糖蛋白相结合的受体,称为E 受体。已E 受体是人T 细胞所特有的表面标志,因此本试验可作为人外周血T 细胞的鉴定和计数,同时作为人细胞免疫功能状态的一个检测指标,也是分离T 细胞的常用方法之一。...

基础免疫实验:冷凝集实验知识及操作步骤

  玻璃试管10支,分别加入生理盐水200微升,第一支加入待测血清200微升,混匀后取出200微升加入第二支试管,依次倍比稀释到第九支试管,取出200微升弃去;同时准备好2%“O”型红细胞500微升,操作离心后“O”型红细胞用生理盐水洗涤3次,取离心洗涤后的红细胞100微升加入4.9毫升的生理盐水中即可.最后加入200微升配好的红细胞到10支试管中,混合后放入4℃冰箱中3小时后判断凝集现象....

免疫细胞检测技术:靶细胞杀伤实验:CFSEPI法

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免疫检测分析:免疫电镜胶体金标记法

金标法是Faulk和Taylor(1971)提出的,并首先用于免疫电镜.它是利用胶体金在碱性中带有负电的性质,使其与抗体相吸附,从而将抗体标记.当用金标记的抗体与抗原反应时,在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色,不需加外进行染色.在电镜水平,金颗粒具有很高的电子密度,清晰可辨.因此,免疫电镜胶体金标记法近年来被成功地应用于生物学的各个方面,并取得了要喜的进展,解决了一些过去未能解决的问题,80年代以来似有取代免疫电镜 PAP技术的趋势.胶体金标记抗体技术在电镜水平应用有许多优点:首先,手续不如PAP法烦琐,不...

基础免疫实验:如何设定抗体实验中各种样品选择的条件

  请先确定您要检测的种属和使用的实验方法,然后查找相关产品,根据说明书上描述的“适用种属和实验方法”来确定合适的抗体.如果说明书中有明确您要检测的种属和实验方法均经过检测,则您可以放心地购买该产品....

免疫细胞检测技术:靶细胞杀伤实验:AnnexiV标记法

正常细胞的磷酯酰丝氨(phosphatidylserine,PS)位于细胞膜内表面,细胞凋亡时翻转露于膜外侧,可与annexinV高亲合力结合.研究发现PS外翻为细胞凋亡的早期事件,先于膜通透性增加所51Cr或其他染料的.将效应细胞与靶细胞充分共育后,用PE结合的效应细胞性单克隆抗体(如CD8-PE)标记效应细胞(不能与PE-mABA结合的细胞即为靶细胞),再用FITC-annexin V标记凋亡靶细胞,用流式细胞仪区分并定量此三类不同的细胞群,即可计算出效应细胞杀伤靶细胞百分数....

免疫疗法组合能够有效治疗小鼠癌症

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免疫检测分析;抗体产生细胞的检测——溶血空斑实验

1) 小鼠免疫4天后,颈椎脱位处死,取脾脏,去除脂肪组织,放平皿内,用冷Hanks液洗1—2次。...