免疫检测分析：荧光免疫技术
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种.很早以来就有一些学者试图将抗体与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位ns等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功.这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique).荧光免疫法按反应体系及定量方法不同,还可进一步分做若干种.与放射免疫法相比,荧光免疫法无放射性污染,并且大多操作简便,便于推广.国外生产的TDM用试剂盒,有相当一部分即属于此类,并且还有专供TD...
ELISA：ELISA中非性显色原因分析
【摘要】:影响ELISA中非性显色的原因很多,如试剂盒性、检验标本中含酶标记物的干扰物,操作过程中的问题.本文就这一原因作一简要分析,以便可以通过以上措施把非显色降至最低限度,从而提高检测的性,并得到更准确、可靠的实验结果....
抗体抗原实验：抗体的荧光标记法
许多蛋白质在其表面含有较多的赖氨酸残基.这些赖氨酸残基的游离ε-氨基可与FITC(其激发波长为492nm, 发射光波长为525nm)共价结合.与FITC结合的抗体可用为性的探针,以测定细胞相应抗原的存在.FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0 .85),而且形成的偶联物的稳定性很好.FITC是应用最广的荧光染料,流式细胞仪就按FITC的特性,设计了激光波长为488 nm,很接近于FITC的最大激发波长492nm)....
免疫细胞检测技术：恶性肿瘤病人外周血免疫指标的流式细胞仪检测及免疫治疗前后免疫功
恶性肿瘤的发生、发展与机体免疫系统密切相关.运用流式细胞术的方法,检测T淋巴细胞表面抗原(CD3、CD4、CD8),B淋巴细胞表面抗原(CD19、CD20),NK细胞表面抗原(CD16+56)在恶性肿瘤病人外周血中的表达,并检测活化T、B、NK淋巴细胞的免疫指标(CD3/HLA-DR、CD3/CD25)的变化,探讨淋巴细胞在肿瘤中的表达状况及其意义,并进一步分析恶性肿瘤病人免疫治疗前后的免疫功能改变,以致使我们更深一层认识肿瘤在细胞水平的免疫功能....
ELISA：ELISA方法的基本原理和操作步骤
1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法.这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性.②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性.在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体...
微生物所等在免疫衰老研究领域取得系列进展
方敏课题组发现在用相同剂量的同种流感病毒分别感染年轻小鼠和老年小鼠后，老年小鼠表现出抵抗力更强的特征。研究发现，年轻小鼠在流感病毒感染后迅速产生强烈的免疫反应，快速清除病毒，但同时造成了严重的肺部病理损伤。而老年小鼠在流感病毒感染之后缓慢产生相对较弱的免疫反应，显着降低肺部病理损伤，病毒的清除虽然有些滞后但最终也可以实现完全清除。相关工作已被Aging and Disease 接收。...
免疫检测分析：同时检测多种病原之快速诊断鉴定技术-xMAP
[/strong] 针对单一种病原或动植物有害生物诊断鉴定技术的要求,是期望能够达到(一)准确、(二)快速、(三)简便等三要项.这三要项中首重的是准确,不准确的鉴定结果,即使再简便、再快速也是枉然.在准确的前提下,其次是能够快速的诊断鉴定出结果,此对于重要疫病原的入侵、蔓延,将可扮演及时关键之角色.在准确与时效上均能符合要求时,简便的操作方式则是另一项重要考虑,当技术、设备或实验室的门坎过高时,则可执行的单位、研究人员便较少,所能发挥共同防杜疫病原入侵之侦测点相对也较少,加上送样至特定实验室需花费许多时间...
抗体抗原实验：嵌合抗CD20Fab’抗体片段Raji 细胞的凋亡机制
兔抗人bcl-2单克隆抗体和辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG为中山生物技术有限公司产品,嵌合抗 CD20Fab’片段为我室表达并纯化....
ELISA：ELISA PROTOCOL（Yale University）
① 免疫组化可以用来进行定位,但是不能精确定量,而且有时会有假阳性,不易与背景区分;Western blot可以性检测某个蛋白质,进行定量,但是不能定位....
基础免疫实验：免疫学常见问题解答
① 免疫组化可以用来进行定位,但是不能精确定量,而且有时会有假阳性,不易与背景区分;Western blot可以性检测某个蛋白质,进行定量,但是不能定位....
免疫检测分析：荧光素标记抗体技术
目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或罗达明(Lissamine rhodamine B200, RB200).在碱性条件下FITC的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε氨基共价结合,标记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力.在荧光灯源紫外线或兰紫光激发下产生黄绿色荧光,通过在荧光显微镜下观察或流式细胞仪分析可对相应抗原进行定性、定位或定量的检测....
抗体抗原实验：筛选解离速率优化的scFv
首先,我们用ELISA识别出结合性克隆.然后,随机挑取20一50个选择的ELISA阳性克隆;根据κoff大小排队比较.再选出那些κoff最低的克隆进行亚克隆、纯化,并用BIAcore进行SRP测定其Kd值.需要注意的是,在scFv情况下,解离曲线形状可以出是否存在单个或多个κoff值.有多个κoff值的scFv(当以R1/R0对于作图时,出现一条曲线对一条直线)是单体和二聚体的混合物,最好避免用于续后的研究....
免疫细胞检测技术：流式细胞术的常用样品制备方法
流式细胞术的实验检测对象是单细胞悬液,因此,在组织化学和免疫组织化学实验中欲对待测样品细胞进行分类计数,也需把样品制备成细胞悬液,并要求被检细胞大小为0.2～80pm,每个样品中至少有20 000个细胞,细胞浓度为105～107个/ml.制备成的单细胞悬液经荧光或免疫荧光标记即可上机检测....