免疫荧光:免疫荧光细胞化学染色方法

  2、洗片:倾去存留的荧光抗体,将切片浸入pH7.4或pH7.2PBS中洗两次,搅拌,每次5min,再用蒸馏水洗1min,除去盐结晶....

实验动物基本参数:心血管实验中动物的选择

  离体兔主动脉条实验:兔主动脉上含有α-受体,它是测定作用于α-受体药物的一个很好标本,已被广泛用来鉴定和分析拟交感药及其对抗药的作用.兔主动脉制备曾试制过多种形式,如主动脉环、片及条状等,但兔主动脉螺旋条是最合适的方法之一.此标本有较多优点,如一个主动脉可制作3~4个标本,可供配对试验,对低浓度拟交感药就很,组织稳定性好,可维持较长时间....

实验动物基础:小鼠突变基因的特点

(2)大脑变性(大脑退化,Cerebral Degenereation,Cb):产生脑积水,通常出生时即表现出来.脑积水可能继发于大脑的广泛性,与胚胎期病毒感染有关....

蛋白表达:转基因植物表达药用蛋白研究进展

  随着现代生物技术的发展,植物基因工程的研究拓宽了植物的使用范围,不仅用于农业,而且延伸到了医药领域,特别是利用转基因植物表达药用蛋白是植物基因工程技术领域引人注目的研究热点之一.转基因植物作为表达药用蛋白的生物反应器,为人类提供了一个更加安全廉价的生产体系.与微生物发酵、动物细胞和转基因动物等生产系统相比,它具有许多优势,例如,植物中不含有潜在的人类病原物,因而使用安全;植物来源广,生产制造简单,可以进行规模化田间种植,生产成本大幅度下降;生物活性蛋白可长期稳定地储存于植物组织或器官中,有利于蛋白的保...

蛋白提取:蛋白质提取与纯化技术简介

  微生物、植物和动物都可做为制备蛋白质的原材料,所选用的材料主要依据实验目的来确定.对于微生物,应注意它的生长期,在微生物的对数生长期,酶和核酸的含量较高,可以获得高产量,以微生物为材料时有两种情况:(1)得用微生物菌体分泌到培养基中的代谢产物和胞外酶等;(2)利用菌体含有的生化物质,如蛋白质、核酸和胞内酶等.植物材料必须经过去壳,脱脂并注意植物品种和生长发育状况不同,其中所含生物大的量变化很大,另外与季节性关系密切.对动物组织,必须选择有效成份含量丰富的脏器组织为原材料,先进行绞碎、脱脂等处理.另外,...

免疫检测分析:免疫沉淀知识

  免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法,是确定两种蛋白质是否在生理条件下有相互作用的有效方法.其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来.如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来.这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用蛋白....

免疫荧光:免疫胶体金银细胞化学染色的固定剂选择

  免疫胶体金银染色和其它免疫细胞化学方法一样,要想得到好的染色效果,关键取决于标本处理是否合适,只有使抗原性及组织结构保存的好,才能使以后的染色成功成为可能,其次要用高性和高效价的一抗,选择合适的稀释度.由于免疫组化方法广泛应用于不同的生物学科,所要检出的抗原种类繁多,性质也各不相同.因此,不可能有一种适用于所有抗原的固定剂,而是根据不同的抗原性质区别对待.根据我们使用的固定剂介绍如下,供参考....

实验动物基本操作:水螅(Hydra)的采集与培养

  水螅体长仅有5毫米,直径只有1毫米左右,体形微小,又栖息于水草丛中,很难被人发现.采集时,要站在水边仔细寻找.寻找时,不能拨动水草,更不能涉入水中.因为水螅稍受惊扰,身体马上缩成小米粒大小,而且迟迟不舒展,这就会增加采集的困难.经过仔细寻找,如果发现水草上有水螅,可以先用广口瓶在远处舀取池水,再用镊子轻轻夹取附有水螅的水草,放入瓶内.通常情况下,如果发现了一条水螅,附近水草上就会有几条甚至几十条,因此要继续寻找和采集.假如时间不允许仔细寻找,或者水草已被搅动,则可从水中捞出水草,在水外仔细观察,如发现...

实验动物模型:大鼠马桑内酯点燃癫痫模型

SD大鼠,6~8周龄,雄性.大鼠每隔84h(3.5d)肌内注射马桑内酯1mk/kg ,点燃后改为每隔7d肌内注射维持量马桑内酯1mk/kg ....

蛋白提取:蛋白提取

  大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液,少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中,因些,可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶....

基础知识:稳定蛋白质三维结构的作用力

氢键(hydrogen bond)在稳定蛋白质的结构中起着极其重要的作用.多肽主链上的羰基氧和酰胺氢之间形成的氢键是稳定蛋白质二 级结构的主要作用力.此外,还可在侧链与侧链,侧链与介质水,主链肽基与侧链或主链肽基与水之间形成....

基础免疫实验:现代免疫学研究进展概况(80年代的重要发现)

  日本学者利根川进和Leder等应用杂交技术证明并克隆出编码IgV区和C区基因.同时应用克隆cDNA片段为探针证明了B细胞在分化发育过程中编码Ig基因结构阐明了Ig抗原结合部位多样性的起源,以及遗传和体细胞空变在抗体多样性形成中的作用,为此利根川进获得了1987年诺贝尔医学....

免疫荧光:免疫荧光非性染色的消除方法

  (4)从组织中难于提纯抗原性物质,所以制备的免疫血清中往往混杂一些抗其他组织成分的抗体,以致容易混淆....

实验动物基本参数:豚鼠主要品种和品系

  (1)近交系2:此品系1906年引自美国农业部,在1951年11代时,Wright采用兄妹交配繁殖到1933年的33代后,改为随机交配,一直到1940年.1940年Heston继续采用兄弟交配.1950年引入美国国立卫生研究院(NIH),并分布于世界,其毛色为三色(黑、红、白),大部分在头部,其体重小于13系,但脾脏、肾脏和肾上腺大于13系,老龄豚鼠的胃大弯、直肠、肾脏、腹壁横纹肌、肺脏和主动脉等部都有钙质沉着,对结核杆菌抵抗力强,并具有纯合的GPL-AB.I(豚鼠主要组织相容性复合体)抗原,血清中缺...

实验动物基础:生物安全实验室建设大全

  10)有可靠的电力供应和应急照明.必要时,重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应设备用电源....