基础免疫实验:角蛋白(Keratin)

  摘要:介绍角蛋白的分类,及不同的克隆生产出不同类型的抗体,如:MNF116,LP34,35BH11,34BE12.

  角蛋白分为表皮角蛋白和细胞角蛋白两种,这是根据其分部的部位而分的.表皮角蛋白包括皮肤表皮,消化道粘膜上皮、腺上皮甲状腺滤泡上皮、气管、支气管上 皮、肺泡上皮,角膜上皮、前列腺上皮等.细胞角蛋白包括颌下腺,胰腺,胸腺,细胞,肝细胞,肾小管细胞等.目前,应用上述细胞中间丝角蛋白作为抗原所制备的抗体有单克隆抗体和多克隆抗体.角蛋白可有19个亚型 ,分为碱性和酸性,从1-8为碱性,9-19为酸性,量40-68不等,复层鳞上皮多为高量,单层上皮则多为低量,了解这些在临床的鉴别诊断及抗体的应用中都有极大的帮助.目前,检测这类特质的抗体很多,根据不同的克隆生产出不同类型的抗体.常用的抗体有:

  该抗体应用范围,各类的冰冻切片,涂片,细胞培养片和经甲醛固定石蜡包埋的组织切片 .用本抗体检测的阳性组织有:鳞状上皮,甲状腺滤泡上皮消化道上皮,胰腺胆管上皮,肝胆管上皮,角膜上皮等以及发生于上述来源的肿瘤.应该注意的是有一些 肿瘤在检测时,可出现两种阳性物,即用两种抗体来检测如采用CK和Vimentin,可出现双向表达阳性的肿瘤有:癌内瘤,子宫内膜腺癌肺腺癌,上皮样内 瘤,滑膜内瘤,唾液腺肌上皮瘤,间皮瘤等等.这是由于在这些肿瘤中存在着两种不同的中间丝的缘故.

  应用该抗体检测呈阴性的肿瘤有:各种淋巴瘤,各类肌源性的肿瘤,恶性黑色素瘤,骨肿瘤,纤维组织肿瘤,脂肪肿瘤,神经组织肿瘤和精原细胞瘤等.

  在检测某些肿瘤时,常可出现这样的问题,在同一张切片上,同样的鳞状细胞癌的细胞,有的抗原表达为强阳性,有的表达为中度阳性性,有的表达为弱阳性,甚至有的呈阴性.这主要是由于各种细胞处于增生的不同阶段,细胞分泌的抗原量不同,因而表达也不同.

  该抗体可用各种方法检测,但最好用真空负压LSAB法.产品说明书注明该抗体稀释度1:50至1:100,我们使用为1:100.

  ②单克隆小鼠抗人细胞角蛋白,克隆为LP34.该抗体的使用范围,检测各种组织基本上与①号抗体相同,但效果不如①号.

  ③单克隆小鼠抗人细胞角蛋白,克隆为35BH11.该抗体的特点是:A,可检测几乎所有的非鳞状上皮包括卵巢腺癌,胃肠道腺癌,甲状腺癌,肝癌, 子宫癌,肾癌等.B、不与鳞状上皮起反应.C、对膀胱癌,鼻咽癌,胸腺癌等部分阳性.但是,该抗体只能用于冰冻切片 ,涂片和细胞培养片.不能用于石蜡切片 .

  ④单克隆小鼠抗人细胞角蛋白,克隆34BE12.该 抗体属于高量类型,它可检测鳞状上皮管上皮和复层上皮的组织及其来源的肿瘤.

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