DNA提取与纯化：小鼠肝组织DNA的提取

　　、脂类、糖类和 RNA等物质，得到纯化的DNA。在本实验的提取DNA反应体系中，SDS（十二烷基磺酸钠）细胞膜和核膜，并使蛋白质变性，将核蛋白中的DNA与蛋白质分开，EDTA及SDS细胞中的DNA酶的活性。用酚、氯仿抽提的方法进一步除去蛋白质，得到的DNA溶液经乙醇沉淀除净小化合物。提取出的 DNA制品进一步用含溴乙锭的琼脂糖凝胶电泳加以鉴定。1. 处死小鼠，迅速取出小鼠肝脏，用生理盐水洗去附着血液，用滤纸吸干血水后称量0.5g肝实质组织放于研钵中。3. 取刻度离心管一支，加肝匀浆至1.0ml，再加入等体积苯酚：氯仿混合液抽提，每次抽提以中等大小的力来回振荡5min，然后离心 3000r/min，10min，水相吸入另一干净的小试管中，抽提重复3次。4. 往乘有上水相的小试管中加入2.5倍体积的冷无水乙醇，轻轻混匀，此时可见有白色絮状沉淀，此即DNA粗制品。5. 将试管中的上清液倒出，保留沉淀。用70％的乙醇洗涤沉淀2次，洗涤时动作要轻柔，同上法弃上清保留沉淀。9. 取琼脂糖0.3g，TBE缓冲液15ml加入锥形瓶中，加热锥形瓶使琼脂糖充分熔解后，加入10ml溴乙锭，混匀后将胶液倒入已放置样孔梳的胶板上。11. 将加好样品液的胶板放入乘有TBE缓冲液的电泳槽中，样孔槽位于阴极侧，盖好电泳槽盖后通电，调节电压100V电泳40-60min。1. 吸水相时不要将界面上的变性蛋白质混入，抽提3次后一般有机相和水相界面上的变性蛋白质极少，基本看不见，若变性蛋白质仍较多，可增加抽提次数。实验中使用的吸取DNA水溶液的滴管管口需粗而短，并烧成钝口。