质粒提取:质粒DNA提取及琼脂糖凝胶电泳检测

  细菌培养物加入SDS和NaOH碱性溶液处理后,菌体裂解,可使细菌的质粒DNA、染色体DNA和RNA一起从细胞内出来,经琼脂糖凝胶电泳,因各种核酸的迁移率不同将上述核酸分成不同的带.用溴化乙锭(EB)染色后,在紫外线灯下可看到各种核酸带发出的荧光.根据荧光的,可区分不同的核酸带.【材料】...

Sci Adv:科学家鉴别出诱发心脏病发生的关键基因

  2017年6月12日 讯 /生物谷BIOON/ --心脏病在美国每年能诱发60万人死亡,而且每四个人中至少有一人死于心脏病,尽管生活方式会直接诱发该病,但遗传因素在疾病的发生过程中也...

探究某个基因的外显子覆盖度情况【直播】我的基因组87

  根据这个图,我们就可以很明显的看出,DMD基因NM_000109本的1,10-17号外显子缺失,用IGV一个个的看这些外显子区域,是同样的结果!可能是芯片捕获不到,也可能是样本本身变异,造成的段缺失。但是这个图的信息就非常有用!(当然,这个肯定不是我的啦,我很正常的哦)...

DNA提取与纯化:MinElute DNA纯化技术

  医学界的技术创新趋势一直都是更准确、更简单、更快速、更廉价、更便携,不断改善治疗效果,提升病人医疗体验,降低医疗成本。对此,笔者过去曾在多篇文章中都有过介绍,相关文章整理到在医疗电子创新专题生物传感器与芯片实验室专题两个专题中。...

微接触印刷技术取得新进展:未来疾病诊断将更便捷!

  医学界的技术创新趋势一直都是更准确、更简单、更快速、更廉价、更便携,不断改善治疗效果,提升病人医疗体验,降低医疗成本。对此,笔者过去曾在多篇文章中都有过介绍,相关文章整理到在医疗电子创新专题生物传感器与芯片实验室专题两个专题中。...

质粒提取:氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA:连续梯度法

许多年来,纯化大量质粒 DNA 的首选方法是 CsCl- 溴化乙锭梯度密度离心法.但由于这种方法耗时费钱,于是发展了许多其他方法,包括差异沉淀法和柱层析法.尽管如此,许多传统的人仍然认为,用 CsCl- 溴化乙锭梯度密度离心法纯化的质粒 DNA 是最纯最好的.由于用 CsCl- 溴化乙锭梯度密度离心法纯化的闭环 DNA 有宿主菌的小片段 DNA 和 RNA 的污染,这些小片段比质粒 DNA 需要更长的是 ianzaiCsCl- 溴化乙锭梯度中达到平衡.因此当闭环 DNA 达到平衡时,小片段仍在不同梯度均与...

“牙疼”?别怪基因了

“糖的摄取以及口腔内的酸性物质,一直是牙科界的信条之一。”该研究高级作者、美国克雷格·文特尔研究所(JCVI)所长 Karen Nelson 说,“这一工作表明,依据变化而获得的特定细菌,易蛀牙。”...

“基因剪刀”CRISPR Cas9 技术使新细胞模型更有效地测试基因治疗的疗效

  慢性肉芽肿病是免疫系统的遗传性疾病。由于基因缺陷,受影响患者的细胞不能摄入的细菌和真菌,引起危及生命的感染和具有严重不良后果的过度炎症反应。该疾病可以通过从健康供体的骨髓移植形成血液的干细胞来治愈。当没有匹配的干细胞供体可用时,可以在全世界的几个进行基因治疗。临床上在患者中使用基因治疗之前,必须在实验室中对人细胞确定治疗的功效,细胞模型对于这一步骤是最重要的。...

质粒提取:质粒的不相容性

  携带相同复制子的质粒是从细胞中的质粒库中随机挑选出来进行复制的.但是,这并不能确保两个不同的质粒在一个菌落中的拷贝数总能保持相同.例如,较大的质粒比较小的质粒需要更多的复制时间,因而在同一个菌落的每个细胞中其选择地位处于劣势.即使质粒大小相似,可可能不相容,这是因为在各个细菌细胞中来自随机过程的复制起始效率是不平衡的.这种不平衡可以很快导致两种质粒在拷贝数上严重失衡.在一些细胞中,一种质粒处于绝对优势;而在另一些细胞中,与之不相容的另一种质粒却占尽上风.在无选择条件下,细菌生长几代之后,占少数的质粒可...

是时候来一波RNA-Seq差异表达分析实操了

  当然你完全不必真的去睡午觉,我们可以程序运行的时候准备一下tximport所需要的输入文件。...

审核25年 首个供食用转基因三文鱼上市

  “这是首个供食用的转基因动物产品上市,是里程碑式的事件。”中科院水生生物研究所研究员胡炜告诉科技日报记者,这是转基因动物育种研究与开发应用的典范,对其他转基因食用动物上市有重要借鉴意义。...

DNA提取与纯化:几种海藻及海洋细菌的DNA制备方法

海洋浮游生物生物量较小,往往需要采集大量的海水样本,过滤收集特定粒径的浮游生物.这里介绍的是一种简单、快速、实用的符合基因PCR扩增需要的浮游生物模板DNA制备方法.1、取40 μL水样,与等体积0.25 mol/L NaOH混合,并于25 ℃温育过夜.2、99 ℃加热10 min,冷却至室温,简单离心收集溶液,依次加入8 μL 1 mol/L HCl,20 μL 0.5 mol/L Tris-HCl(pH 8.0)和10 μL 2% (v/v,体积分数)Triton X-100,...

DNA提取与纯化:外周血DNA提取技术

2. 消化:上述DNA提取液混悬白细胞,37℃水浴温育1h后,加入1mg/ml蛋白酶K0.2ml,至终浓度为100-200ug/ml,上下转动混匀,液体变粘稠.50℃水浴保温3h,裂解细胞,消化蛋白.保温过程中,应不时上下转动几次,混匀反应液....

DNA提取与纯化:酵母DNA微量制备

  这次的试验结果早于预期,是一个出乎意料的惊喜,阿斯利康希望该药物成为一款年销售额达数十亿美元的重磅级药物。该公司表示正与监管机构讨论这款药物的上市申请事宜。“对于不适合手术的局部晚期肺癌患者来说,这些结果是无比令人鼓舞的,”阿斯利康全球药品发展执行副总裁Bohen在一份声明中如是称。...

DNA提取与纯化:从96孔微培养板生长的哺乳动物细胞中分离DNA

5、将叶子移出温箱,取出培养板平放在工作台上,冷却数分钟,每孔加入100ul NaCl/乙醇溶液.不用混匀,直接将培养板于室温温育30min.温育末期硬件到纤维状的核酸沉淀....