最新!魔剪CRISPR“脱靶效应”有了“克星”

在介绍新前,先带大家回顾一下去年UCSF的研究人员获得这一重要发现。在这一发表于Cell上题为“Inhibition of CRISPR-Cas9 with Bacteriophage Proteins”的论文中,科学家们找到了在细菌和人类细胞中能都能够CRISPR系统基因编辑活性的anti-CRISPR剂。具体来说,研究发现了两个CRISPR“关闭开关”:AcrIIA2和AcrIIA4。它们通过阻碍Cas9酶的活性发挥作用。...

Cancer Dis:科学家发现新靶点 有助开发癌症治疗新药

  —最近,来自美国大学的研究人员发现靶向一种对肿瘤生长非常关键的酶能够帮助对抗癌症,该研究将有助于开发黑色素瘤、胰腺癌和结直肠癌生长的新药物。相关研究结果在...

质粒提取:质粒的复制

无论是质粒,还是其复制子,均能通过合理分配提供影响质粒 DNA 合成起始效率的而维持其自身的复制与宿主增殖速率的协调.在携带 p MB1/colE 复制子的质粒中,这种正向调节式一种 RNA, 被称为 RNA Ⅱ,它被永固走引发 DNA 前导链的其实合成.但是,其他复制子(如 p SC101 )的调节则是一种顺式作用蛋白( RepA ) , 它对复制的起始具有正向作用,而对其自身基因的具有负调控作用.在任何情况下,正向调控的 RNA 和蛋白质的合成和活性都受到辅助性的反式作用产物的调节,后者的浓度随质粒拷...

质粒提取:在质粒载体中进行定向克隆

旋转柱层析装置 ,温度可调 16 ℃的水浴装置方法1、用两种适当的性内切核酸酶消化载体( 10ug )和外源 DNA 片段.为进行直接克隆,用两种性内切酶消化闭合环状的质粒载体,这样可以识别不同的序列以及产生不同的末端.无论哪段序列,我们应尽可能避免选用在多克隆位点上相距 12 个碱基以内的酶切位点,如果有一个酶切位点被切开,那么第二个酶切位点将离线状 DNA 的末端很近而影响第二个酶的酶切效率 .阅读生产厂家的说明以确定两种酶是否可在同样的缓冲液中工作.如果可以,就能用两种酶同时对质粒 DNA 进行消化...

DNA提取与纯化:DNA片断的树脂回收技术

1. 对于>3Kb的片断在纯化回收时,洗脱前,如先将水或TE缓冲液预热到65-80℃,则将能有效的提高回收率。待洗脱片断>3Kb时,洗脱液温度应为65-80℃;待洗脱片断>20Kb时,洗脱液温度应达80℃。2. 应用TAE缓冲液,而不应用含TBE的胶,因硼酸能与琼脂糖中的方式糖单体或多聚体结合成难溶复合物,这种复合物使胶难熔解。3. 在取用纯化柱树脂中的液体前,应将树脂充分搅匀,如树脂中出现结晶或结块,则应将树脂在25-37℃,温热10分钟,冷却至30℃使用。树脂本身不会溶。4. 在紫外...

DNA提取与纯化:植物基因组DNA提取

  通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞,由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响,在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性.在液氮中研磨,材料易于破碎,并减少研磨过程中各种酶类的作用....

Cell:免疫疗法不起效?化疗药物来助攻!

  所谓免疫疗法,就是利用人体自身的免疫系统对抗肿瘤。众所周知,免疫系统能帮助我们抵抗病毒感染之类的疾病,但却对肿瘤束手无策。事实上,在肿瘤突变早期,它们也处于免疫系统的之下。但是,的肿瘤自身会表达一些免疫反应的,如PD-L1,以对抗免疫系统的。在免疫系统和肿瘤的持久战中,疲惫的T细胞逐渐失去功能并在细胞表面表达一些免疫反应的,如PD-1,这就是我们所说的T细胞耗竭。...

癌症治疗新法:溶瘤腺病毒有效肺癌和结肠癌细胞

“这些进行过基因工程的病毒癌细胞的机制完全不同于化学疗法和辐射疗法的机制”,Saint Louis University School of Medicine 的微生物学和免疫学系主任William Wold博士说。“这些病毒将有可能治疗许多现有疗法无法处理的癌症。也有可能利用这些病毒和其他现有疗法相结合以创造出新型的治疗体系。”...

AR和VR将彻底改变医疗技术

MD+DI有幸采访了位于美国明尼阿波利斯的设计公司Worrel的高级研发顾问、AR和VR专家Brandon Bogdalek先生,了解为什么AR和VR技术正在流行以及它们对医疗设备开发人员来说意味着什么。以下是内容。...

研究人员发现神秘的CRISPR开关机制,或将终结技术应用风险 I 医麦黑科技

  最近来自美国国家过敏症与传染病研究所、斯克里普斯研究所、蒙大拿州立大学、大学分校和大学的研究人员首次解析了病毒的抗CRISPR蛋白和细菌的CRISPR复合物结合的结构,准确地了病毒如何让细菌的防御系统完全崩溃,他们发现病毒体内的抗CRISPR蛋白可以把细菌的CRISPR系统“器”给遮挡住,然后细菌的防御系统就失灵了,无法识别和病毒基因组。...

DNA提取与纯化:适用于PCR的优化基因组的分离

  帕金森病是一种慢性进展性的神经退行性疾病,是由于制造多巴胺的神经元造成的,表现为震颤、运动缓慢、僵硬、姿势不稳定等,发展到晚期甚至引起摔倒、无法迈步、语言和吞咽困难等,需要人照顾日常生活。它影响了全球约700万至1000万人。但目前还没有可以有效延缓或逆转疾病进程的治疗。左旋多巴是标准治疗方法。早期帕金森病患者通常可以通过左旋多巴较好地控制病情,但随着疾病进展,患者对治疗的响应也变得越来越差。据估计,约有15%的帕金森病患者有运动能力波动,并且经左旋多巴治疗不能很好的控制。患者会经历更长时间的运动能力...

帕金森病基因疗法VY-AADC01取得积极进展

  帕金森病是一种慢性进展性的神经退行性疾病,是由于制造多巴胺的神经元造成的,表现为震颤、运动缓慢、僵硬、姿势不稳定等,发展到晚期甚至引起摔倒、无法迈步、语言和吞咽困难等,需要人照顾日常生活。它影响了全球约700万至1000万人。但目前还没有可以有效延缓或逆转疾病进程的治疗。左旋多巴是标准治疗方法。早期帕金森病患者通常可以通过左旋多巴较好地控制病情,但随着疾病进展,患者对治疗的响应也变得越来越差。据估计,约有15%的帕金森病患者有运动能力波动,并且经左旋多巴治疗不能很好的控制。患者会经历更长时间的运动能力...

2017易体痴呆诊断标准出炉,哪些更新要注意?

  看起来只需要临床核心特征和提示标记物。支持临床特征和支持标记物有啥用?是打酱油的么?当然不是啦,只不过单独这些特点对于诊断DLB的准确性不够,但是临床上还是要综合来看,毕竟这些“榜上有名”的都是候补主力。三个臭皮匠还顶个诸葛亮,咸鱼还会翻身,以后说不定还会来个屌丝的逆袭。...

脂肪肝与肾功能损害——是时候提高意识了

  近期的一项横断面研究显示,慢性肾脏疾病(CKD)影响20%-50%的NAFLD患者,其患病率显著高于美国一般人群(11%)的患病率。纵向研究也显示NAFLD患者中CKD的发病率增加。NAFLD不仅成为肝移植的第二指征,也迅速发展为肝肾联合移植的指征。然而,尽管有这些资料,但关于NAFLD中CKD的认识还不甚明确,目前还没有筛查或发现病例策略的具体。由于其发病率和潜在的严重演变,早期发现CKD和确定可改变的因素非常重要。此外,尚不清楚脂肪变性、脂肪性肝炎和纤维化中与CKD风险增加相关的NAFLD的严重程...

基因测序,风口上的思考

  由于基因测序是一个新的投资方向,又是资源稀缺性项目,对很多投资机构来说很难确定真实估值,恰巧市场有一家融资成功的同类公司估值两个亿,于是大家就以这家公司作为参比。最后认定一个亿的估值,A和B放弃对赌协议,各投资了500万。...