免疫检测分析:E 玫瑰花环形成试验的原理及方法

  摘要:正外周血中T 细胞在体外能直接和绵羊红细胞(SRBC)结合形成玫瑰花样细胞团。这是因为人的T 细胞膜上具有能和SRBC 膜上的糖蛋白相结合的受体,称为E 受体。已E 受体是人T 细胞所特有的表面标志,因此本试验可作为人外周血T 细胞的鉴定和计数,同时作为人细胞免疫功能状态的一个检测指标,也是分离T 细胞的常用方法之一。本实验介绍了E 玫瑰花环形成试验的原理及方法。

  正外周血中T 细胞在体外能直接和绵羊红细胞(SRBC)结合形成玫瑰花样细胞团。这是因为人的T细胞膜上具有能和SRBC 膜上的糖蛋白相结合的受体,称为E 受体。已E 受体是人T 细胞所特有的表面标志,因此本试验可作为人外周血T 细胞的鉴定和计数,同时作为人细胞免疫功能状态的一个检测指标,也是分离T 细胞的常用方法之一。

  3. 经SRBC 吸收的灭活的新生小牛血清(NBS),取无菌NBS 置56℃水浴经30分钟灭活,取已灭活的NBS 2 体积,加入经洗涤后的压积SRBC l 体积,混匀后置37℃温箱30 分钟,离心沉淀,吸取上层血清即成。

  1. 取肝素抗凝血1ml 加1ml Hanks 液,混匀后用尖吸管将其加在2m1 分层液上。

  2. 离心2000rpm,30 分钟,用尖吸管吸取血浆与分层液界面处富含淋巴细胞的悬液置于另一洁净试管中。

  3. 用Hanks 液以1000rpm,离心10 分冲洗细胞两次,末次弃上清后再加入Hanks液1ml,混匀,用微量加样器吸取0.02ml 加于0.38ml白细胞计数液中,在血球计数板上于低倍镜下计数,并根据下式算出每毫升细胞数。

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