免疫荧光:免疫印迹法的自动化应用进展

  摘要:免疫印迹法是一种对生物样本中的性蛋白进行检测分析的技术,是检测蛋白性、表达与分布的最常用方法。但是传统操作难以满足实验室高通量,规范化的检测要求。

  前言:免疫印迹法是一种对生物样本中的性蛋白进行检测分析的技术,是检测蛋白性、表达与分布的最常用方法。但是传统操作难以满足实验室高通量,规范化的检测要求。因此为适应临床诊断的需求,新的印迹法技术被不断的探索和发展。欧蒙作为全球血清学诊断领域的领导者,经过多年的探索和完善,提出了一套完整的免疫印迹法检测自动化解决方案,这大大提高了免疫印迹法检测的效率,实现了免疫印迹法检测结果的标准化判读和评估。

  实验室自动化是体外诊断领域的发展趋势,如何高效,准确的完成临床检测,成为了自动化技术发展的关键。欧蒙公司针对免疫印迹法检测的特点,研发出了一套完整的免疫印迹法自动化检测解决方案,包含用于免疫印迹检测中膜条自动温育和清洗的印迹法自动操作仪(EUROBlotMaster),数字化图像处理系统(EUROBlotCamera、平板扫描仪),和标准化检测结果判读系统(EUROLineScan)。

  为印迹法自动操作设备,在EUROBlotMaster内预置了针对EUROIMMUN 检测系统的检测程序,支持自身抗体、病原体、过敏原等上百种项目的检测,可单次处理大批量样本,不同项目可整合在同次实验中进行。

  欧蒙印迹法图像处理系统是通过对反应后的试验膜条进行高清拍摄(EUROBlotCamera)或者扫描(平板扫仪),得到一组可以使用标准化判读软件(EUROLineScan)识别判读的数字高清图片,来实现膜条的数字化存储。

  EUROLineScan软件是由欧蒙公司开发的一套全自动半定量膜条分析程序,该程序可以实现复杂数据的简单化管理和结果存档,大大提高了工作效率。通过平板扫描仪或EUROBlotCamera可直接将膜条图像录入计算机系统,继而识别膜条测定条带的反应结果并自动将结果为直观的图像报告样式。系统将结果和图像资料保存,具有潜在传染性的检测膜条不需要单独存档,可为每位患者生成检测报告,判读分析结果可整合入实验室LIS系统。

  在传统的免疫印迹法检测中,通常是通过手工试验,目测观察膜条显色带的深浅,来判断不同显色条带的性果。随着欧蒙印迹法自动化解决方案的面世,实现了免疫印迹法检测操作的自动化,结果判读的标准化。武永康等 [1]对148例病人血清进行实验分析,分别使用EBM系统配合EUROLineScan自动判读软件和目测判读实验结果,数据分析,结果显示,目测判读法和EUROLineScan软件分析法(使用平板扫描仪)判读结果一致性达88.43%,两方法一致性判断 Kappa值为0.669,P=0.02,表明两种方法检测结果具有一致性。

  相较于目测判读具有一定的主观性且变异度大等不足,软件分析法的结果重复性明显优于目测判读法的结果重复性,软件分析法客观性强、能克服不同操作者间对结果判断的主观性差异,使不同操作者可以得到较为一致的检测结果。此外,软件分析法还提供条带灰度值,值的大小与患者体内的自身抗体浓度具有正相关关系,可以给临床医生提供更多更准确的实验结果信息。

  目前国内大多数实验室已普遍采用实验室信息系统(LIS),由传统的自身抗体目测判读法得出的结果,必须通过手工录入信息系统,以便进行报告的打印和结果查询。软件分析法可以通过特定的信息接口将对应标本的结果自动导入信息系统,从技术上了结果录入的准确性。此外,软件分析法通过图像扫描解决了原始实验膜条的保存问题,有效避免了膜条潜在的生物传染性。

  实验室自动化已经成为中国体外诊断领域的一个必然趋势,自动化设备可以提高实验室诊断的效率和准确性。用于免疫印迹检测中膜条自动温育和清洗的印迹法自动操作仪(EUROBlotMaster),数字化图像处理系EUROBlotCamera、平板扫描仪),和标准化检测结果判读系统(EUROLineScan),组成了印迹法自动化整体解决方案。未来这类印迹法自动化整体解决方案的实施,必将促进印迹法相关检测项目的标准化、规范化,有效推动相关临床检验项目的发展。

  1.EUROLneScan分析软件在免疫印迹法检测自身抗体中的应用探讨,武永康,王兰兰 ,蔡蓓,张崇唯,《中华试验诊断学》,2007(12)1615-1617

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