我国是乙型肝炎高感染的国家.有资料显示,全国人口中有10%以上为,感染率非常高,而低浓度在人群中的分布率为0.53%[1].目前常规的ELISA检测方法容易造成漏诊[2],在临床上应用有一定局限性.随着免疫技术的不断发展,抗原抗体检测灵敏度得到了明显提高,而TRFIA是一种高灵敏、准确、快速的方法,可以较大的减少漏诊.本文用这两种方法检测HBVM,旨在探讨二者之间的关系及临床应用.
TRFIA法使用上海新波生物技术有限公司生产的Anytest-2000型时间分辨荧光免疫分析系统及配套试剂.ELISA法使用奥地利BIOELLHTⅡ型自动酶标仪,试剂由标佳生物技术有限公司提供.
HBVM的变化是评估乙型肝炎感染后病情转归的重要依据,也是抗病毒治疗的疗效考察指标之一,目前国内检测HBVM使用较多的仍是ELISA法,主要有以下缺点:;灵敏度低;由检测原理带来的前带现象无决;易传染,无法完成HBV感染的动态观以及低水平HBV感染指标检测.
TRFIA法是近年来发展的无污染、高灵敏度的免疫标记检测技术.因稀土离子本身激发光谱宽而产生荧光发射光谱窄,从而了该技术的高精密度,以稀土离子为标记物,通过时间延迟技术,去除了非性荧光干扰,明显提高了检测灵敏度,并通过激发光与发射光之间较大的STOKES位移,提高了光谱的分辨率,使性明显增强,又采用了独特的荧光解离增强技术,可使有效荧光的效率增强约100万倍,从而使灵敏度增高,并具有定量检测功能[3].
有文献[4]报道,TRFIA对HBsAg的最小检测浓度可达到0.05 ng/ml,比ELISA法约高10倍.就乙肝医学模式而言,本研究显示:ELISA法检测1、5阳性者及2、5阳性者的人数要高于TRFIA法,并且两种方法在前者的检测率上差异有显著性(P<0.05),TRFIA法在其他模式上的检出人数均高于ELISA法,主要还是由于ELISA法检测 HBeAg与HBeAb的阳性例数较低所致,故使乙肝医学模式的鉴定有所差异,并将可能造成临床诊断及治疗的失误.
有资料报道[5],5%~10%的普通人和98%的新生儿在感染HBV后都有能力清除病毒,因此成为慢性携带者.有1/3的HBsAg携带者中的慢性肝炎会在5 a~10 a中转变为肝硬化,如果HBsAg持续6个月以上,就会出现携带状况,当HBsAb浓度至少为100 U/L时,对病的免疫力可维持10 a.因此检测的灵敏度与准确性就至关重要,TRFIA法就充分显示出了这一方面的优势,它对HBVM有以下临床意义:可以了解药物疗效为医生治疗提供依据;有利于病情动态观察,为治疗方案提供线索;有利于对免疫状况进行评估,为注射乙肝疫苗提供指导.
总之,TRFIA较ELISA结果稳定,并可定量分析,近年来TRFIA技术应用范围不断扩大[6,7],在微量分析中有着广泛的应用前景.
[1]王跃国,王惠民,毛利萍,等A法测定乙肝病毒表面抗原的评价及临床应用[J].现代检验医学,2004,19(2):2123.
[3]李振甲,陈沣藻,高平.时间分辨免疫技术与应用[M],:科学技术出版社,1996:2126.
[4]额尔敦,其其格,郭美香,等.双抗HgsAg抗体夹心时间分辨免疫荧光分析方法的建立[J].中国免疫学,1999,15:808.
[5]魏来,陶其敏.努力规范肝脏疾病免疫学诊断[J].中华检验,2003,26:6971.
[6]顾爱萍,李庆国,,等.丙型肝炎病毒抗体的时间分辨荧光分析方法检测[J].临床检验,2001,19(4):215.
[7]黄飚,肖华龙,朱利国,等.糖蛋白抗原199时间分辨荧光免疫分析[J].中华检验医学,2000,23(3):171.
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