1、建立了载体,表达目标基因+GFP的融合卵白(用的是PEGFP-N1),转染48小时后,处置细胞,百分之七十乙醇固定留宿,PI单染上流式测周期!因为,转染效率太低,通过了流式设门别离圈出了阳性和阳性细胞,再别离测其CELL周期变化!成果如附图!
(1)正在一些SCI文献中报道,通过MTT法,此目标基因表达,推进一些细胞(非我用的细胞系,我用的转染CELL,之前没有报道!)增殖,可是,从周期图来看,转进去的阳性CELL,反而停正在G0/G1期了,取阳性CELL比拟,增殖的S+G2/M期CELL较着削减!
统一学校有人建立了统一目标基因的载体,表达非融合卵白(带了HIS标签,非GFP卵白),不变转染了和我同样的细胞系,流式测周期,成果是取对比,转染的℃ELL S+G2/M的细胞较着增加和我的成果纷歧样!
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