彩色免疫金银法(coloured IGSS简称CIGSS)是在IGSS基础上发展起来的一种新方法.其基本原理与彩色显影相似.IGSS方法染色在抗原位点处生成银颗粒经铁氰化钾与溴化钾的作用即被氧化成溴化银,后者与彩色显影剂相接触立即被还原成金属银,而彩色显影剂本身则被氧化,其氧化产物使彩色成色剂由无色变成有色的染料并沉积在银颗粒的部位,金属银变成了银离子.由于染料只能通过彩色显影剂沉积在有银的部位,所以不与组织发生非性吸附.
结果:CIGSS的优点:①阳性结果比黑色更鲜明;②可以使弱信号得到放大;③消除IGSS背景染色;④信号/背景比值高;⑤是开展免疫金银双标技术的新途径.光镜下见HBsAg阳性物质呈鲜艳的蓝色(α-萘酚为成色剂)或呈绿色(菲尼酮为成色剂).背景干净,阳性结果清楚.
彩色免疫金银法,在胶体金技术中是一个很大的突破,它的优点是结果鲜明,对比度好,但是在彩色显影过程中时间过长,背景可有一些着色,彩色显影的时间控制很重要.一旦过染可用以下方法处理.
(1)纯酒精滴到切片上3～5s,立即冲掉,水洗,充分地把酒精洗掉,如果洗不彻底,造成阳性结果脱色.
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