免疫检测分析：放射免疫分析试剂

　　标准品是放射免疫分析量的依据,由于以标准品的量用来表示被涮物质的量,故标准品与被测物质应当化学结构一致并具有相同免疫活性.标准品作为定量的基准.应要求高度纯化.标准品除含量应具有准确性外,还应具备稳定性,即在合理的贮存条件下保持原来的特性.

　　标记抗原应具备:①比放射性高,以方法的灵敏度;②免疫活性好;③所用的核素的半衰期尽可能长,标记一次可较长时间使用,这对来之不易的抗原尤其重要;④标记简便、易防护.

　　要准确测量B与F的放射性,必须有足够的放射性强度.所选用的标记抗原的量,在使用125I时达5000～15000cpm.

　　目前最常用的缓冲液有下列几种:①磷酸盐缓冲液;②醋酸盐缓冲液;③巴比妥缓冲液;④Tris –HCl缓冲液;⑤硼酸缓冲淮.其中以磷酸盐缓冲液应用最多.

　　在缓冲液中,除必须有弱酸及弱酸的盐成分外,还应根据不同检测项目加入下列物质:①蛋白:常用的有牛血清白蛋白或白明胶,浓度为0.1%～0.2%,用以降低试管对抗原的非性吸附.②防腐剂:多采用0.1%叠氮钠、0.01%柳硫汞、溶菌酶或抗菌素.③酶剂:如测定心钠素等肽类激素时,要加入适量的抑肽酶,用以血浆内源性水解酶对待测物的降解;又如测定cAMP、cGMP时,需加入EDTA·2Na,磷酸二酯酶的活性.④阻断剂:在测定甲状腺激素或测定某些甾体激素时,必须加阻断剂,使和蛋白质相结合的激素,变为游离型.常用的阻断剂有8—苯胺—1—萘磺酸、柳硫汞、水杨酸钠、三氯醋酸钠等.⑤载体蛋白:采用二抗作B与F分离剂时,要向反应液中加入适量与第一抗体同种动物的正常血清.在测定不含有血浆蛋白的样品时,用PEG沉淀剂分离B、F,必须加适量γ球蛋白或正混合血清.