免疫检测分析：生物素-亲和素系统(BAS)—ELISA技术

　　摘要：介绍生物素-亲和素系统(BAS)—ELISA技术的发展、应用,及三大类BAS用于检测的基本方法.

　　20世纪70年代后期在免疫酶技术中利用生物素-亲和素系统(biotin-avidinsystem,BAS)标记抗体发展了又一种新型生物反应放大技术,即BAS-ELISA技术,它使用生物素-亲和素-过氧化物酶复合物作为剂,组成一新的生物放大系统进一步提高检测的度.生物素(biotin)是广泛分布于动植物体内的一种生长因子,又称辅酶R或维生素H.亲和素(avidin)是卵白及某些微生物中的一种蛋白质,由4个亚单位组成.二者有高度亲和力,且均能偶联抗体、抗原和辣根过氧化物酶而不影响其生物学活性.

　　在生物素-亲和素系统中,借助所形成的亲和素-生物素-酶复合物,追踪生物素标记的抗原或抗体,通过酶催化底物显色,可检出相应的抗体或抗原.由于抗原或抗体可偶联多个生物素,且1个亲和素可结合4个生物素,组成新的生物放大系统,进一步提高检测的灵敏度.由于BAS亲和力高,所以具有高灵敏度、高性和稳定性等优点,在现代生物免疫学领域中已得到广泛应用,并显示出明显的优越性.已报道有用于放射免疫、免疫荧光和免疫电镜等技术中,但应用更多的还是在酶免疫技术中.

　　第二类以亲和素两端分别连接生物素化大反应体系和标记生物素,称为BAB法,或桥联亲和素-生物素法(BRAB);

　　第三类是将亲和素与酶标生物素共温形成亲和素-生物素-过氧化物酶复合物,再与生物素化的抗抗体接触时,将抗原-抗体反应体系与ABC标记体系连成一体,称为ABC法.