摘要：将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应.其优点是方法简便、性高,非性荧光染色少.
将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应.其优点是方法简便、性高,非性荧光染色少.缺点是性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体.此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查.
2、滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考：30min).
5、立即用荧光显微镜观察.观察标本的性荧光强度,一般可用“+”表示：(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧亮;(+++ --++++)荧光闪亮.待检标本性荧光染色强度达“++”以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性.
1、对荧光标记的抗体的稀释,要抗体的蛋白有一定的浓度,一般稀释度不应超过1：20,抗体浓度过低,会导致产生的荧光过弱,影响结果的观察.
2、染色的温度和时间需要根据各种不同的标本及抗原而变化,染色时间可以从10 min到数小时,一般30 min已足够.染色温度多采用室温(25℃左右),高于37℃可加强染色效果,但对不耐热的抗原(如流行性乙型脑炎病毒)可采用0-2℃的低温,延长染色时间.低温染色过夜较37℃30 min效果好的多.
如果标本自发荧光对照和性对照呈无荧光或弱荧光,阳性对照和待检标本呈强荧光,则为性阳性染色.
4、一般标本在高压汞灯下照射超过3min,就有荧光减弱现象,经荧光染色的标本最好在当天观察,随着时间的延长,荧光强度会逐渐下降.
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