抗体抗原实验：用高效液相色谱纯化小鼠腹水中单克隆抗体

　　从小鼠腹水中纯化mcab的方法有盐析、离子交换层析、凝胶过滤和亲合层析等。应用tsk deae-spw离子交换层析柱从小鼠腹水中纯化mcab不仅纯化速度快，回收率和得率高，而且保持良好的生物学活性。

　　根据离子交换原理，将经硫酸铵粗提的含mcabγ球蛋白上样结合于层析柱上，通过增加洗脱液中的离子强度，洗脱并收集蛋白峰。

　　1. 腹水离心10000 g，10min，除去细胞和杂质，在4℃下逐滴加入饱和硫酸铵溶液，使终浓度为40%饱和硫酸铵;

　　5. 用带有1000μl样品环的高压加样活门将透析后粗提物加样于经缓冲液a液平衡的tsk deae spw离子交换层析柱;

　　2. 在本实验条件下，IgG1峰一般在线min。但不同类和亚类抗体以及不同性mcab 的存留时间(retention time)有所差异。